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賽默飛世爾科技(中國)有...

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WB(Western blot)與凝膠成像系統(tǒng)怎么選?賽默飛 iBright——多功能成像系統(tǒng)

閱讀:113      發(fā)布時(shí)間:2025-8-21
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在分子生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中,Western blot(蛋白質(zhì)印跡)和凝膠成像是最常見的分析手段。隨著科研需求的增加,研究人員越來越傾向選擇操作簡便、結(jié)果可靠且符合合規(guī)要求的成像系統(tǒng)。作為科學(xué)服務(wù)品牌,本文聚焦于 Invitrogen iBright 成像系統(tǒng),解釋它為何能成為實(shí)驗(yàn)室從能用"好用"的升級之選。 

 

一臺設(shè)備覆蓋核心與進(jìn)階應(yīng)用:從凝膠成像系統(tǒng)"多功能成像系統(tǒng)

 

iBright 提供多達(dá) 五種成像模式,涵蓋蛋白凝膠、核酸凝膠、化學(xué)發(fā)光 Western blot、熒光 Western blot,以及可混合信號的 Universal 模式;每次采集會自動記錄可見圖像,便于分子量等后續(xù)分析。這意味著它既是凝膠成像系統(tǒng),也是化學(xué)發(fā)光成像儀/WB 化學(xué)發(fā)光成像儀與熒光平臺的多功能成像系統(tǒng),顯著提升設(shè)備利用率。 

圖像模式 

可捕獲哪種信號? 

蛋白預(yù)制膠 

凝膠(例如,考馬斯亮藍(lán)染色、銀染)和膜(例如,麗春紅、Thermo Scientific Pierce Reversible Protein Stain)的比色染色,凝膠的熒光染色(例如,Invitrogen SYPRO Ruby 染色) 

核酸凝膠 

溴化乙錠和 Invitrogen SYBR 染色 

化學(xué)發(fā)光 Western Blot 

使用各種常用 HRP  AP 底物(如 Thermo Scientific SuperSignal  Invitrogen WesternBreeze 底物)的化學(xué)發(fā)光印跡? 

熒光印跡 

使用常用 RGB(可見光范圍)和近紅外熒光基團(tuán)(如 Invitrogen Alexa Fluor  Alexa Fluor Plus 偶聯(lián)物)進(jìn)行熒光染色 

通用 

自定義模式,用于對包含多種信號的樣品進(jìn)行成像,例如化學(xué)發(fā)光、熒光、比色染色和/或可見圖像;圖像顯示類似于熒光印跡模式,允許為任意樣品添加偽彩色 

 

強(qiáng)大的攝影成像功能保證 可發(fā)表級"圖像 

 

· 9.1 MP 冷卻 CCD 相機(jī),在默認(rèn)與可調(diào) binning 設(shè)置下兼顧分辨率、靈敏度與成像速度,適合不同場景的數(shù)據(jù)采集。 

 

· Smart Exposure™ 自動曝光能快速給出各通道曝光,降低過曝/欠曝風(fēng)險(xiǎn);熒光多通道會分別優(yōu)化曝光時(shí)間,減少通道間的妥協(xié)。 


· Smart Range™ HDR 將一長一短兩張曝光合成為 16-bit HDR 圖像,把中高豐度與低豐度條帶同時(shí)拉進(jìn)線性范圍,實(shí)測可將檢測范圍從約 2.5 個(gè)數(shù)量級擴(kuò)展到約 3 個(gè)數(shù)量級,更利于 WB 定量與復(fù)現(xiàn)。 

圖片1.png 

(1:檢測范圍從2.5數(shù)量級擴(kuò)展至3個(gè)數(shù)量級

這些特性針對 WB 化學(xué)發(fā)光成像的痛點(diǎn)而生,讓看得清、量得準(zhǔn)"成為常態(tài)。 

 

省時(shí)高效:直觀交互與機(jī)械級"對齊 

 

12.1 英寸電容觸控屏配合一致的工作流,降低學(xué)習(xí)成本;自動變焦與自動對焦會根據(jù)樣品大小自動放大至合適視野(22.5×18.0 cm 視野,最高 ),CL1500/FL1500 采用機(jī)械變焦以提升靈敏度。 

 

更關(guān)鍵的是,CL1500/FL1500 支持 ±10° 機(jī)械式自動旋轉(zhuǎn):與數(shù)字旋轉(zhuǎn)"不同,機(jī)械旋轉(zhuǎn)不會引入像素鋸齒,條帶邊緣更平滑,數(shù)據(jù)完整性更好。 

 

多重?zé)晒猓阂淮紊夏ぃ卮鸶嗌飳W(xué)問題 

 

iBright FL1500 提供 5 組激發(fā)/發(fā)射通道,一次實(shí)驗(yàn)可進(jìn)行最多四色熒光多重;列舉了 AKT/GSK-3 通路等多靶標(biāo)檢測實(shí)例,適合通路研究與近紅外(NIR)應(yīng)用。濾光片范圍與兼容染料在手冊中給出,便于方法學(xué)設(shè)計(jì)與復(fù)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)條件。熒光通道的曝光由 Smart Exposure 分別優(yōu)化,降低多重妥協(xié)的代價(jià)。 

圖片2.png 

(2:大視野(22.5 x 18.0 cm)最多可采集 4 塊小型印跡膜或凝膠。

圖像拍攝即分析:從儀器到軟件的一體化體驗(yàn) 

 

iBright Analysis Software 提供桌面版(Windows/macOS)、云端版(Thermo Fisher Connect)與 Secure 安全版;支持圖庫管理、自動識別泳道/條帶、分子量估算、密度學(xué)與歸一化,批量導(dǎo)出 PDF 報(bào)告與 Excel 原始數(shù)據(jù)。對 4 mini /膠可一次自動分析,減少重復(fù)勞動與主觀差異。 

 

合規(guī)支持 

 

賽默飛提供 SAESecurity, Auditing, E-signature) 方案以支持 21 CFR Part 11:賬戶與權(quán)限、密碼策略、審計(jì)日志與電子簽名均可在 SAE 管理控制臺中集中配置;配合 iBright Analysis Software—Secure 與儀器固件的 SAE 模式,形成流程級合規(guī)支持(提示:合規(guī)既含技術(shù)也含流程,仍需實(shí)驗(yàn)室 SOP 配合)。 

 

蛋白歸一化工作流程 

 

為了消除不均一的蛋白樣品濃度、不一致的凝膠上樣量以及從凝膠到膜的不均勻轉(zhuǎn)印所帶來的樣品變異,通常會通過比較目標(biāo)蛋白與 GAPDH、β-tubulin、β-actin 等內(nèi)部管家蛋白對照,進(jìn)行一個(gè)歸一化步驟。盡管管家蛋白過去一直是歸一化的,但比較目標(biāo)蛋白與總泳道蛋白的策略可成為更準(zhǔn)確的歸一化方法。 

 iBright   成像系統(tǒng)和  iBright 分析軟件提供多種定量和歸一化選項(xiàng),補(bǔ)償實(shí)驗(yàn)或樣品的變異,從而讓您找到實(shí)驗(yàn)方法。 

 

安全與可持續(xù):用綠色 LED 替代 UV 

 

iBright 成像系統(tǒng)采用綠色 LED 透射光源,可有效激發(fā)溴化乙錠和 SYBR Green 染料等常用 DNA 染料,同時(shí)具有更多優(yōu)點(diǎn)。 

· 不使用有害的紫外線:盡管紫外光可有效激發(fā)許多熒光染料和染色劑,但紫外線會危害健康。此外,長時(shí)間暴露于紫外光可能會損傷 DNA 樣本,并影響用于下游應(yīng)用(如亞克?。┑臉悠吠暾?。 

· 無汞廢物: 紫外透射燈可能含有有害物質(zhì)汞,因此在處理和處置時(shí)需要特別小心。 

· 更長的使用壽命: LED 燈珠的實(shí)際使用壽命比紫外燈管長更長,因此,在儀器的使用壽命內(nèi)可以節(jié)省大量成本。 

服務(wù)與支持 

 

全系附帶 SmartStart 培訓(xùn)(CL1500/FL1500 現(xiàn)場培訓(xùn),CL750 提供數(shù)字培訓(xùn)),并提供 質(zhì)保與延保服務(wù)、AB Assurance PlanIQ/OQ 等,幫助維持高開機(jī)率與合規(guī)文檔完備。手冊末頁給出了型號對比與訂購信息,便于按需選型與后續(xù)擴(kuò)展。 

 

與常見替代方案的差異 

 

· 自動化與線性范圍:Smart Exposure + Smart Range HDR WB 化學(xué)發(fā)光的線性范圍更寬;一些入門方案更依賴人工試錯,重復(fù)性不易保障。 

 

· 數(shù)據(jù)完整性:機(jī)械旋轉(zhuǎn)避免數(shù)字旋轉(zhuǎn)的像素鋸齒,條帶更平滑;市面上多數(shù)僅提供數(shù)字旋轉(zhuǎn)或需手工重放樣品。 

 

· 多重?zé)晒饽芰Γ?/span>FL1500 提供 5 通道、4色多重;解決了部分WB成像平臺通道數(shù)少、更換濾片或近紅外支持受限,方法學(xué)遷移成本更高。 

 

· 合規(guī)方案:原生的 21 CFR Part 11 支持(賬戶/審計(jì)/電子簽名)減少外接或自建系統(tǒng)的不確定性。 

 

· 安全環(huán)保:綠色 LED 替代 UV,降低對人員與樣品的潛在傷害與環(huán)保負(fù)擔(dān)。 

以上差異點(diǎn)用于說明 iBright 的優(yōu)勢取向,具體對比仍需以各廠商公開規(guī)格與實(shí)驗(yàn)室既有流程為準(zhǔn)。 

結(jié)論:功能強(qiáng)大易操作的 WB 與凝膠成像 

 

如果你的目標(biāo)是:化學(xué)發(fā)光 Western blot 的高動態(tài)范圍與定量可靠性、熒光多重的一致復(fù)現(xiàn)、從數(shù)據(jù)到合規(guī)的一體化、以及更安全可持續(xù)的日常操作,那么 iBright 成像系統(tǒng)提供的硬件、算法、軟件與服務(wù)組合,能在科研真實(shí)場景中落到實(shí)處。這也是為什么越來越多團(tuán)隊(duì)把 iBright 作為從凝膠成像系統(tǒng)到多功能成像系統(tǒng)的升級之選,并把它用作日常的 WB 化學(xué)發(fā)光成像儀。 

如果您對產(chǎn)品感興趣,希望咨詢或試用,請?jiān)L問賽默飛

 


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