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諾博萊德  動(dòng)物組織/細(xì)胞基因組DNA提qu試劑盒 Animal Tissues/Cells Genomic DNA Extraction Kit

動(dòng)物組織/細(xì)胞基因組DNA提qu試劑盒質(zhì)粒提取

產(chǎn)品貨號(hào)：D9588

產(chǎn)品名稱(chēng)：動(dòng)物組織/細(xì)胞基因組DNA提qu試劑盒 Animal Tissues/Cells Genomic DNA Extraction Kit

英文名稱(chēng)：Animal Tissues/Cells Genomic DNA Extraction Kit

產(chǎn)品規(guī)格：50T/100T

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

儲(chǔ)存條件：酶附件-20℃，其它試劑RT，復(fù)檢期1年

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)

   NobleRyderD9588  動(dòng)物組織/細(xì)胞基因組DNA提qu試劑盒本試劑盒采用可以特異性結(jié)合DNA的離心吸附柱和du特的緩沖液系統(tǒng)，提取組織和細(xì)胞的基因組DNA。 離心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料為本公司te有新型材料，能夠高效、專(zhuān)一吸附DNA，可最大限度去除雜質(zhì)蛋白及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物。 提取的基因組DNA片段大，純度高，質(zhì)量穩(wěn)定可靠。使用本試劑盒提取的基因組DNA可用于各種常規(guī)操作，包括酶切、 PCR、文庫(kù)構(gòu)建、Southern雜交等實(shí)驗(yàn)。

操作步驟：

1. 樣品的處理：

(1) 細(xì)胞：取1×106-1×107個(gè)懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，12000rpm離心1min收集細(xì)胞，貼壁細(xì)胞先用yi蛋白酶消化處理，再用預(yù)冷的PBS吹打成細(xì)胞懸液，然后12000rpm離心1min收集細(xì)胞，盡量除去上清，加200μL溶液A，振蕩至che底混勻。

(2) 組織：組織量不宜過(guò)大，一般不要超過(guò)25mg，可以使用勻漿器勻漿，最好用液氮研磨成粉末狀，再用預(yù)冷的PBS或無(wú)菌水充分懸浮，然后12000rpm離心1min收集細(xì)胞，盡量除去上清，加200μL溶液A，振蕩至che底混勻。

2. 向懸浮液中加入2μL RNase A，55℃放置5min。

3. 加入20μL的蛋白酶K，充分顛倒混勻，56℃水浴消化，細(xì)胞消化時(shí)間較短，組織消化時(shí)間較長(zhǎng)，一般需要1-3個(gè)小時(shí)才能完成（鼠尾需要消化過(guò)夜）。消化期間可顛倒離心管混勻數(shù)次，直至樣品消化wan全為止。消化wan全的指標(biāo)是：液體清亮及粘稠。

4. 加入200μL體積溶液B，充分顛倒混勻，如出現(xiàn)白色沉淀，可在75℃放置15-30min，沉淀即會(huì)消失，不影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如溶液未變清亮，說(shuō)明樣品消化不che底，可能導(dǎo)致提取的DNA量少及不純，還有可能導(dǎo)致堵塞吸附柱。

5. 加入200μL無(wú)水乙醇，充分振蕩混勻15s，溶液變清亮。此時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀沉淀，不影響DNA的提取，將溶液和絮狀物都加入吸附柱中。

6. 12000rpm 離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。

7. 向吸附柱中加入600μL 漂洗液（使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇），12000rpm 離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。

8. 重復(fù)步驟7。

9. 12000rpm 離心 2min，將吸附柱敞口置于室溫或 50℃溫箱放置數(shù)分鐘，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除，否則漂洗液中的乙醇會(huì)影響后續(xù)的實(shí)驗(yàn)如酶切、PCR等。

10. 將吸附柱放入一個(gè)干凈的離心管中，向吸附膜中央懸空滴加50-200μL經(jīng)65℃水浴預(yù)熱的洗脫液，室溫放置5min，12000rpm離心2min。

11. 可將離心所得洗脫液再加入吸附柱中，12000rpm 離心 2min，即可得到高質(zhì)量的基因組DNA。

注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒拆封后，RNase A和蛋白酶K需放置-20℃保存。

2. 樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融，否則會(huì)導(dǎo)致提取的DNA片段較小且提取量也下降。

3. 如果試劑盒中的溶液出現(xiàn)沉淀，可在65℃水浴中重新溶解后再使用，不影響效果。

4. 洗脫緩沖液的體積最好不少于50μL，體積過(guò)小會(huì)影響回收效率：洗脫液的pH值對(duì)洗脫效率也有影響，若需要用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在8.0左右（可用NaOH將水的pH值調(diào)至此范圍），pH值低于7.0會(huì)降低洗脫效率。

動(dòng)物組織/細(xì)胞基因組DNA提qu試劑盒質(zhì)粒提取

產(chǎn)品訂購(gòu)信息

D9588  動(dòng)物組織/細(xì)胞基因組DNA提qu試劑盒 Animal Tissues/Cells Genomic DNA Extraction Kit  50T

D9588  動(dòng)物組織/細(xì)胞基因組DNA提qu試劑盒 Animal Tissues/Cells Genomic DNA Extraction Kit  100T