產品簡介：

由沙門氏菌屬的某些致病性沙門氏菌引起的雞群細菌性傳染病稱為雞沙門氏菌病，一般分為雞白痢、雞傷寒   和副傷寒三種病型，其中以雞白痢和雞傷寒發(fā)病較多，危害較強。雞白痢是由雞白痢沙門氏菌（S.Pullorum）感染雞群引起的，主要是侵害雛雞。2 周以下的雛雞發(fā)病后死亡率可達 40%-70%，受感染的雛雞在 4-7 天死亡，急性時可在 1-3 天死亡。雞傷寒-沙門氏菌（S.Gallinarum）感染雞群可引起雞傷寒病癥，主要是感染成年雞，雛雞有時也會被感染， 出殼后幾天開始發(fā)病， 死亡率較高。 現(xiàn)在， 這兩種致病菌統(tǒng)稱為雞- 雛沙門氏

（S.Gallinarum-Pullorum），沒有鞭毛，不會運動，只會感染雞群，可存在于卵巢、睪丸、肝臟等器官中，能夠通過親代感染子代，因此對養(yǎng)雞業(yè)的危害極大。

本試劑盒適用于肝臟、脾臟等組織樣品以及腸內容物樣品，糞便樣品，泄殖腔拭子樣品等樣品中的雞白痢/雞傷寒-沙門氏菌，用于雞白痢/雞傷寒-沙門氏菌感染的輔助診斷。

產品特點：

一、嚴格的質控體系

所有試劑盒從原料到成品都經過嚴格的質量控制，確保每一盒試劑盒都具有穩(wěn)定可靠的質量，讓您的檢測結果更可信。

二、高靈敏度

產品經過不斷優(yōu)化，具有出色的靈敏度，能夠檢測到極微量的雞白痢/雞傷寒-沙門氏菌核酸，不放過任何潛在的感染風險。

三、便捷操作

綜合各項指標特性，研發(fā)出操作便捷的試劑盒。從樣本制備到結果分析，每一步都有清晰的操作指南，即使是新手也能輕松上手。

四、多樣的檢測驗證樣本

該試劑盒經過多種樣本的檢測驗證，適用于肝臟、脾臟等組織樣品以及腸內容物樣品，糞便樣品，泄殖腔拭子等多種常見樣本，滿足不同的檢測需求。

五、個性化定制服務

專業(yè)的研發(fā)團隊可為您提供個性化的定制服務，根據(jù)您的特殊需求進行產品優(yōu)化和調整，為您提供更貼合實際的檢測方案。

六、豐富的產品線

除了雞白痢/雞傷寒-沙門氏菌(SP/SG)PCR試劑盒，我們還提供Elisa試劑盒以及其它快檢試劑盒，滿足您在不同領域的檢測需求。

七、完善的售前售后服務

我們擁有完善專業(yè)的售前售后服務團隊，在您購買前為您提供詳細的產品咨詢和技術支持，購買后為您解決使用過程中遇到的任何問題，讓您無后顧之憂。

產品參數(shù)：

產品規(guī)格

50T/盒，可滿足一定規(guī)模的檢測需求。

檢測方法

實時熒光PCR，具有快速、準確、靈敏等優(yōu)點。

適用儀器

ABI7500、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。

標本采集

組織樣品：選擇具有典型臨床癥狀的病死雞，無菌取其肝臟、脾臟等組織樣品，放置于無菌容器內，標記好   組織名稱和采樣日期，冷藏運送到實驗室進行檢測。

肛拭子樣品：采集肛拭子樣品時，取無菌棉拭子插入畜禽肛-門或泄殖腔中，旋轉 2 圈~3 圈，刮取直腸黏液或糞便，放入裝有 30%甘油磷酸鹽緩沖液或半固體培養(yǎng)基中送檢。

腸內容物樣品：取腸內容物時，應燒烙腸壁表面，用吸管中扎穿腸壁。從腸腔內吸取內容物放入盛有滅菌的

30%甘油磷酸鹽緩沖液或半固體培養(yǎng)基中送檢或將帶有糞便的腸管兩端結扎，從兩端剪斷送檢。

糞便樣品：應選新鮮糞便至少 10g，運送糞便樣品可用帶螺帽容器或滅菌塑料袋，不得用帶皮塞的試管。

保存和運輸

采集或處理好的樣品在 2℃~8℃條件下保存應不超過 24 h；若需長期保存，應放置-70℃以下保存，凍融不超過 3 次。

使用方法：

1.樣品處理（樣本處理區(qū)）

1.1樣本前處理

組織樣品：每份組織分別從不同的位置稱取樣品約 1g，手術-剪剪碎混勻后取 0.5g 于研磨器中研磨，加入 1.5mL生理鹽水后繼續(xù)研磨，待勻漿后轉至 1.5mL 滅菌離心管中，8000rpm 離心 2min，取上清液 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中；水樣便 13000rpm 離心 2min，去盡上清；其它樣品處理參考 NY/T541-2016。

1.2核酸提取

推薦采用上海烜雅生物科技有限公司生產的核酸-提取或純化試劑（磁珠法或離心柱法）進行核酸提取，請   按照試劑說明書進行操作。

2.試劑配制（試劑準備區(qū)）

根據(jù)待檢測樣本總數(shù)，設所需要的 PCR 反應管管數(shù)為 N（N=樣本數(shù)+1 管陰性對照+1 管陽性對照；反應管數(shù)每滿 10 份，多配制 1 份），每測試反應體系配制如下表：

試劑SP/SG 反應液酶液

用量（樣本數(shù)為 N）19μL1μL

將混合好的測試反應液分裝到 PCR 反應管中，20μL/管。

3.加樣（樣本處理區(qū)）

將步驟 1 提取的核酸、陽性質控品、陰性質控品各取 5μL，分別加入相應的反應管中，蓋好管蓋，混勻，短暫離心。

4.PCR 擴增（核酸擴增區(qū)）

4.1將待檢測反應管置于熒光定量 PCR 儀反應槽內；

4.2設置好通道、樣品信息，反應體系設置為 25μL；

熒光通道選擇：檢測通道（Reporter Dye）FAM， 淬滅通道（Quencher Dye）NONE，ABI 系列儀器請勿選擇 ROX

參比熒光，選擇 None 即可。

4.3推薦循環(huán)參數(shù)設置：

步驟循環(huán)數(shù)溫度時間收集熒光信號

11 cycle95℃2min否

245 cycles95℃15sec否

60℃30sec是

5.結果分析判定

5.1結果分析條件設定（請參照各儀器使用說明書進行設置，以分析 ABI7500 儀器為例）

反應結束后自動保存結果，根據(jù)分析后圖像調節(jié) Baseline 的 Start 值、End 值以及 Threshold 值（用戶可根據(jù)實際情況自行調整，Start 值可設在 3～15、End 值可設在 5～20，使閾值線位于擴增曲線指數(shù)期，陰性質控品的擴增曲線平直或低于閾值線），點擊 Analyze 自動獲得分析結果。

5.2結果判斷

陽性：檢測通道 Ct 值≤40，且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線； 陰性：樣本檢測結果 Ct 值>40 或無 Ct 值。

5.3質控標準

陰性質控品：無特異性擴增曲線或無 Ct 值顯示；

陽性質控品：擴增曲線有明顯指數(shù)增長期，且 Ct 值≤32； 以上條件應同時滿足，否則實驗視為無效。

6.檢測方法的局限性

1.樣本檢測結果與樣本收集、處理、運送以及保存質量有關；

2.樣本提取過程中沒有控制好交叉污染，會出現(xiàn)假陽性結果；

3.陽性對照、擴增產物泄漏，會導致假陽性結果；

4.病原體在流行過程中基因突變、重組，會導致假陰性結果；

5.不同的提取方法存在提取效率差異，會導致假陰性結果；

6.試劑運輸，保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降，出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準確的結果；

7.本檢測結果僅供參考，如須確診請結合臨床癥狀以及其他檢測手段。

注意事項：

1.所有操作嚴格按照說明書進行；

2.試劑盒內各種組分使用前應自然融化，完-全混勻并短暫離心；

3.反應液應避光保存；

4.反應中盡量避免氣泡存在，管蓋需蓋緊；

5.使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服；

6.樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進行，以免交叉污染；

7.實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器；

8.試劑盒里所有物品應視為污染物對待，并按照《微生物生物醫(yī)學實驗室生物安全通則》進行處理。

9.本產品僅供科研。

選擇我們的雞白痢/雞傷寒-沙門氏菌(SP/SG)PCR試劑盒，就是選擇精準、高效、可靠的檢測方案，為您的科研實驗保駕護航！