產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

外泌體是指包含了復(fù)雜 RNA 和蛋白質(zhì)的小膜泡 (40-100 nm)，主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。所有培養(yǎng)的細(xì)胞類型均可分泌外泌體，多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體， 且外泌體天然存在于體液中，包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關(guān)其分泌、攝取、組成、“運(yùn)載物"及其相應(yīng)功能的精確分子機(jī)制的研究還處于起步階段。但從外泌體提取核酸（主要是 RNA）非常棘手，為此本公司開(kāi)發(fā)了外泌體核酸（DNA 和 RNA） 純化試劑。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1.一管式操作，在同一試管中完成，減少樣品丟失。

2.沉淀法，不使用離心柱，能有效避免小 RNA 的丟失。

3.能同時(shí)提取 RNA（包括 RNA 和 miRNA）和 DNA。

4.回收率達(dá)到 90%以上，高于絕大部分基于離心柱的提取方法。

5.無(wú)毒環(huán)保，不需要使用苯-酚和氯仿等有毒的有機(jī)溶液。

6.外泌體 DNA-RNA 純化試劑盒（沉淀法）只能用于科研，不能。用于臨床。

產(chǎn)品參數(shù)：

成份規(guī)格包裝材料

外泌體 DNA-RNA 純化溶液 A30 mL30 mL 本色瓶

外泌體 DNA-RNA 純化溶液 B35 mL60 mL 本色瓶

外泌體 DNA-RNA 純化溶液 C50 mL60 mL 本色瓶

RNase-free 水1 mL1.5 mL 本色管

使用手冊(cè)1 份1 份

運(yùn)輸及保存

常溫運(yùn)輸保存，但外泌體核酸提取溶液 A 長(zhǎng)期保存需要放 4℃。有效期一年。

自備試劑

外泌體。

使用方法：

制備外泌體（本試劑盒不提供相關(guān)試劑）

注意：自備的外泌體需要立即使用或放-80℃長(zhǎng)期保存。用于核酸提取的外泌體可以是沉淀，也可以是重懸液。

二、外泌體核酸提取

1.從冰箱取出外泌體 DNA-RNA 純化溶液 A，放室溫或握在手上融化，直到?jīng)]有任何晶體，再充分搖勻待用。

2.標(biāo)記 1.5-2 mL 螺旋蓋塑料離心管。為避免污染，建議不要使用壓蓋式塑料離心管。最好在每個(gè)管蓋上做個(gè)標(biāo)記，以在下步離心時(shí)有意將標(biāo)記方向朝向心面或離心面。

3.將不超過(guò) 200 μL 的外泌體重懸液加入到標(biāo)記好的塑料離心管中。

4.每管中加入 600 μL 外泌體 DNA-RNA 純化溶液 A，蓋上蓋子后振蕩數(shù)秒混勻。

5.室溫放置 3 分鐘。

6.加入 0.7 mL 外泌體 DNA-RNA 純化溶液 B，旋緊蓋后振蕩 30 秒混勻。

7.14,000×g 室溫離心至少 15 分鐘。注意：離心時(shí)如果把標(biāo)記固定朝向心面或離心面，則在后面的操作均得按此朝向進(jìn)行離心。

8.小心移棄上清，注意不要觸及管底和管壁離心面的核酸沉淀（此時(shí)可能看不見(jiàn)）。

9.加入 1.0 mL 外泌體 DNA-RNA 純化溶液 C, 振蕩數(shù)秒.

10.14,000×g 室溫離心 5 分鐘。

注意：離心管標(biāo)記的朝向要跟上面的一致。

11.小心移棄上清，注意不要觸及管底和管壁離心面的核酸沉淀（可能在離心管內(nèi)壁的離心面呈膜狀）。

12.再短暫離心數(shù)秒, 用移液器移棄殘留液體（約 50 μL）。

13.加入 200 μL RNase-free 水，用移液槍仔細(xì)吹打離心管管底和管壁離心面的膜狀沉淀。如果溶液稍呈混濁狀屬于正常。

注意：所得溶液即為外泌體核酸溶液。如果只需要 RNA，必須去除 DNA，則另外

用自備的 RNase-free DNase 對(duì) DNA 污染進(jìn)行降解。反之如果只需要 DNA，必須去除 RNA，則另外用自備的 DNase-free RNase 對(duì) RNA 污染進(jìn)行降解。

14.直接取適量用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。樣品可以室溫放置 2 小時(shí)，也可保存于-80℃保存一個(gè)月。

選擇我們的外泌體 DNA-RNA 純化試劑盒（沉淀法），就是選擇精準(zhǔn)、高效、可靠的檢測(cè)方案，為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航！