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目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>分子生物學試劑>>試劑盒>> cDNA 第二鏈合成試劑盒

cDNA 第二鏈合成試劑盒
  • cDNA 第二鏈合成試劑盒
參考價 395
訂貨量 ≥1
具體成交價以合同協(xié)議為準
395
≥1
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 品牌 烜雅生物
  • 型號
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 上海市
屬性

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更新時間:2025-05-20 09:09:28瀏覽次數(shù):65評價

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10次
貨號 XY-D-1853 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 科研 英文名稱 Second Strand cDNA Synthesis Kit
保存條件 -20℃ 有效期 1年
cDNA 第二鏈合成試劑盒即開即用,含有合成 cDNA 第二鏈的所有試劑,包括 RNase H、E.coli DNA
聚合酶 1 和 DNA 連接酶。

產(chǎn)品簡介:

cDNA 第二鏈合成試劑盒的起始材料是已經(jīng)完成第一鏈 cDNA 合成的RNA-DNA 雜交鏈。其原理是用 RNase H 使 RNA-DNA 雜合鏈中的 RNA 產(chǎn)生切口,再用 DNA Polymerase I 通過切口平移(nick translation)反應(yīng)進行 RNA鏈取代合成 cDNA 第二鏈,其示意圖如下:


cDNA 第二鏈合成試劑盒


產(chǎn)品特點:

1.即開即用,含有合成 cDNA 第二鏈的所有試劑,包括 RNase H、E.coli DNA聚合酶 1 和 DNA 連接酶。

2.一管式操作,不需要每次進行純化,不丟失寶貴的樣品。

3.所得雙鏈 cDNA 可以直接用于后續(xù)的常規(guī) PCR、real-time PCR、cDNA文庫構(gòu)建、抑制性差減雜交等。

4. 本試劑盒足夠 10 次 80 uL 體系的 cDNA 第二鏈合成反應(yīng)。


產(chǎn)品參數(shù):

名稱 規(guī)格包裝

5×cDNA 第二鏈合成緩沖液 160 μL0.5 mL 白蓋管

20×cDNA 第二鏈合成

酶混合液 40 μL0.5 mL 黃蓋管

0.2 M EDTA 溶液 60 μL0.5 mL 本色管

超純水 1 mL1.5 mL 藍蓋管

使用手冊 1 份無

運輸及保存

低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。

自備試劑

cDNA 第一鏈合成試劑等


使用方法:

一、合成 cDNA 第一條鏈

本試劑盒不提供 cDNA 第一鏈合成試劑,用戶需自備相關(guān)試劑合成 cDNA

第一鏈。

二、合成 cDNA 第二鏈

1.在冰浴上向 10uL 已經(jīng)完成 cDNA 第一條鏈合成的反應(yīng)體系(逆轉(zhuǎn)錄體系) 中依次加入下表試劑,如果多于 10uL,請只取用 10uL:

注:克隆雙鏈 cDNA 一般需要平末端化,需要 T4 DNA 聚合酶處理步驟。PCR、SSH 等后續(xù)處理一般不需要把雙鏈 cDNA 平末端化,則可以跳過 T4 DNA 聚合酶處理步驟,直接用 EDTA 終止反應(yīng)。

2.終止反應(yīng):如果后續(xù)實驗(如電泳)不擔心 EDTA 的影響,可以直接加入 4 uL 0.2M EDTA 溶液終止反應(yīng),然后將樣品放-20℃長期保存。如果后續(xù)實驗

(如PCR 擴增)不擔心 cDNA 的單雙鏈狀態(tài),可以 95℃保溫 10 分鐘終止反應(yīng)。如果后續(xù)實驗既受 EDTA 影響,又不能是單鏈 DNA,則可以用 PCR 過柱純化法純化。

3.電泳 5 μL 檢測 cDNA 質(zhì)量。如果 cDNA 在 0.5-10Kb 的范圍內(nèi)呈模糊一片,則 cDNA 合格。如果沒看見 cDNA 或有其他異常,需查找原因后再繼續(xù)。

4.所得 cDNA 可以直接用于后續(xù)的常規(guī) PCR、real-time PCR、cDNA 文庫

構(gòu)建、抑制性差減雜交(SSH)等實驗。

選擇我們的cDNA 第二鏈合成試劑盒,就是選擇精準、高效、可靠的檢測方案,為您的科研實驗保駕護航!

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