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擔(dān)體和固定液的要求及其形態(tài)結(jié)構(gòu)介紹

閱讀:4075      發(fā)布時(shí)間:2021-1-26
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   擔(dān)體和固定液的選擇一般根據(jù)所謂的“相似性原則”,即固定液的性質(zhì)與被分離組分之間的某些相似性,如官能團(tuán)、化學(xué)鍵、極性、某些化學(xué)性質(zhì)等,性質(zhì)相似時(shí),兩種分子間的作用力就強(qiáng),被分離組分在固定液中的溶解度就大,分配系數(shù)大,因而保留時(shí)間就長;反之溶解度小,分配系數(shù)小,因而能很快流出色譜柱。
 
  擔(dān)體和固定液的要求:
  1、揮發(fā)性小,操作溫度下有較低蒸氣壓,以免流失。
 
  2、熱穩(wěn)定性好,操作溫度下不發(fā)生分解和聚合反應(yīng),并且液體狀態(tài),保持固定液原來的特性。
 
  3、對試樣有一定的溶解能力,以免被測組分被帶走起不到分配作用。
 
  4、具有良好的選擇性,即操作條件下,對沸點(diǎn)相近或者性質(zhì)相似的不同物質(zhì)有盡可能高的分離能力。
 
  5、化學(xué)穩(wěn)定性好,不與被測組分,擔(dān)體,載氣發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。
 
  擔(dān)體和固定液在于保存細(xì)胞和組織的原有形態(tài)結(jié)構(gòu),固定劑能阻止內(nèi)源性溶酶體酶對自身組織和細(xì)胞的自溶、抑制細(xì)菌和霉菌的生長。固定劑通過凝固、生成添加化合物等使蛋白質(zhì)內(nèi)部結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,從而使酶失活。固定劑對細(xì)胞核細(xì)胞外成分發(fā)生物理改變。
  固定液主要分為醛類固定液、汞類固定液、醇類固定液、氧化劑類固定液、酸鹽類固定液等,較為常用的是醛類中的福爾馬林、醇類中的乙醇。組織細(xì)胞固定液主要由優(yōu)質(zhì)PFA、磷酸鹽、DEPC處理水組成,pH為7.4,適合于絕大多數(shù)組織和細(xì)胞的固定,尤其適用于與RNA有關(guān)實(shí)驗(yàn),它能較好的保護(hù)組織和細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)以及RNA。

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