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C18液相色譜柱的沖洗方法
c18液相色譜柱是很常用、每個實驗室需要的通用型色譜柱。填料是硅膠基質上鍵合十八烷基,有較高的碳含量和較好的疏水性,適用于大多數(shù)化合物,包括非極性、極性小分子及一些多肽及蛋白質。
第一、安捷倫的色譜柱有很多種,所以要分清類型去沖洗。,第二、作為普通C18柱,尤其是硅膠基質的普通C18柱,對酸堿鹽以及水,都是造成柱子的損壞的流動相構成。
水不能過多(除了帶AQ的純水柱,一般各家品牌都有這款防水柱)我個人認為只要超過80%的水的流動相,都會造成C18的壽命縮短。
所以做高水相的流動相分析時請注意選合適的柱子。
酸對柱子的損傷是不可逆的,一定要控制PH,我個人認為PH在2以下的都要做好費柱子的準備。
堿性條件是對于硅膠基質的C18的弱項,一般的硅膠基質的C18堿性條件都不太耐用,但現(xiàn)在也有堿性PH11的柱子,但比較貴。
鹽對色譜柱的影響主要是鹽析造成的,而且是致命。,第三沖洗方法的問題。
沖洗方法根據(jù)使用的流動相和樣品的不同沖洗方法要加以區(qū)分。
一般不加酸堿鹽,水相也不高的情況(如甲醇水60:40),無需太過沖洗,沖洗的目的就是為了把樣品的雜質沖出即可。