血液中乙醇濃度的氣相色譜分析

過(guò)量飲酒已經(jīng)成為世界公共衛(wèi)生的主要問(wèn)題，目前我國(guó)對(duì)飲酒量檢測(cè)主要通過(guò)檢測(cè)血液中的乙醇濃度。

血液中乙醇濃度的測(cè)定有化學(xué)法、傳感器法、酶法和氣相色譜法等，其中氣相色譜法是目前使用較普遍的方法。本文利用乙醇的易揮發(fā)性，以叔丁醇為內(nèi)標(biāo)，用頂空自動(dòng)進(jìn)樣氣相色譜，火焰離子化檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，建立的方法樣品用量少，操作簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確度高，能對(duì)血液中的乙醇進(jìn)行可靠分析。

１設(shè)備

氣相色譜儀：天津蘭博GC6500氣相色譜儀，配FID檢測(cè)器，頂空自動(dòng)進(jìn)樣器。

2 試劑

乙醇，叔丁醇均為色譜純。

3 分析步驟

3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

　用移液槍分別取0.10 ml配制成不同濃度的乙醇標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.10 mg/ml、0.20 mg/ml、0.50 mg/ml、1.00 mg/ml、2.00 mg/ml、3.00 mg/ml)加入預(yù)先加有0.50 ml叔丁醇內(nèi)標(biāo)工作液（濃度為0.04 mg/ml)的頂空自動(dòng)進(jìn)樣器樣品瓶?jī)?nèi)，用封蓋器蓋上帶有硅橡膠墊的頂空鉗口蓋，混勻，置于頂空自動(dòng)進(jìn)樣器中加熱后測(cè)定。以乙醇濃度為橫坐標(biāo)，乙醇對(duì)叔丁醇的峰面積比為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

3.2 樣品分析

用移液槍移取0.10 mL待測(cè)血液樣品于預(yù)先加有0.50 ml叔丁醇內(nèi)標(biāo)工作液（濃度為 0.04 mg/ml)的頂空自動(dòng)進(jìn)樣器樣品瓶?jī)?nèi)，用封蓋器蓋上帶有硅橡膠墊的頂空鉗口蓋，混勻，置于頂空自動(dòng)進(jìn)樣器中加熱后測(cè)定。

3.3色譜條件

色譜柱：GDX-102（60目～80目）填充色譜柱(2 m × 3 mm)；

載氣：高純氮?dú)?，流?0.0 ml/min；

氫氣：30 ml/min；空氣：300 ml/min；尾吹氣：28 ml/min；

進(jìn)樣器溫度：150℃；檢測(cè)器溫度：250℃；

柱溫：70℃；

進(jìn)樣量：1.0 ml，分流比：5:1；

頂空條件：樣品瓶溫度70℃，平衡時(shí)間15 min，進(jìn)樣閥溫度：105℃，管路溫度110℃。

3.4結(jié)果與討論

在規(guī)定的色譜條件下進(jìn)樣，以乙醇濃度為橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的峰面積為縱坐標(biāo)，繪制工作曲線。建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=1.7092x+0.0468，r＝0.998。標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖如圖1所示。

圖1 乙醇和叔丁醇色譜圖

空白血中分別加入不同量的乙醇后制成不同濃度的三份樣品，以上面的條件每份樣品重復(fù)測(cè)定6次，平均回收率在97.8% ～104.3%之間，RSD在2.0%以下，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 回收率與精密度試驗(yàn)結(jié)果（n=6）

4結(jié)論

　　本文建立的自動(dòng)頂空氣相色譜法測(cè)定血液中的乙醇方法，操作簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確度高，能滿足血液中乙醇含量的檢驗(yàn)要求，自動(dòng)化程度高，分析時(shí)間短，適合批量樣品檢驗(yàn)需求。