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賽默飛色譜及質(zhì)譜

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這樣操作賽默飛高效液相色譜,簡(jiǎn)單易懂!

閱讀:5620      發(fā)布時(shí)間:2022-4-25
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  賽默飛高效液相色譜是基于高效液相色譜法的理論及原理,涵蓋了小顆粒填料、非常低系統(tǒng)體積及快速檢測(cè)手段等全新技術(shù),增加了分析的通量、靈敏度及色譜峰容量。主要用于各種藥物及其制劑的分析測(cè)定,尤其是生物樣品、中藥等復(fù)雜體系的成分的分離分析,可對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析。超高效液相色譜儀的速度、靈敏度及分離度分別是傳統(tǒng)的高效液相色譜儀的9倍、3倍及1.7倍,它縮短了分析時(shí)間,同時(shí)減少了溶劑用量降低了分析成本。 
 

 

  賽默飛高效液相色譜的操作步驟:
  1、過(guò)濾流動(dòng)相,根據(jù)需要選擇不同的濾膜(0.45um)。
  2、對(duì)抽濾后的流動(dòng)相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。
  3、打開(kāi)HPLC工作站,連接好流動(dòng)相管道,連接檢測(cè)系統(tǒng)。
  4、進(jìn)入HPLC控制界面主菜單,點(diǎn)擊manual,進(jìn)入手動(dòng)菜單。
  5、有一段時(shí)間沒(méi)用,或者換了新的流動(dòng)相,需要先沖洗泵和進(jìn)樣閥。沖洗泵,直接在泵的出水口,用針頭抽取。沖洗進(jìn)樣閥,需要在manual菜單下,先點(diǎn)擊purge,再點(diǎn)擊start,沖洗時(shí)速度不要超過(guò)10ml/min。
  6、調(diào)節(jié)流量,初次使用新的流動(dòng)相,可以先試一下壓力,流速越大,壓力越大,一般不要超過(guò)2000。點(diǎn)擊injure,選用合適的流速,點(diǎn)擊on,走基線,觀察基線的情況。
  7、設(shè)計(jì)走樣方法。點(diǎn)擊file,選取select users and methods,可以選取現(xiàn)有的各種走樣方法。若需建立一個(gè)新的方法,點(diǎn)擊new method。選取需要的配件,包括進(jìn)樣閥,泵,檢測(cè)器等,根據(jù)需要而不同。選完后,點(diǎn)擊protocol。一個(gè)完整的走樣方法需要包括:
 ?、佟⑦M(jìn)樣前的穩(wěn)流,一般2-5分鐘;
  ②、基線歸零;
 ?、邸⑦M(jìn)樣閥的loading-inject轉(zhuǎn)換;
 ?、?、走樣時(shí)間,隨不同的樣品而不同。
  8、進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作。選定走樣方法,點(diǎn)擊start。進(jìn)樣,所有的樣品均需過(guò)濾。方法走完后,點(diǎn)擊postrun,可記錄數(shù)據(jù)和做標(biāo)記等。全部樣品走完后,再用上面的方法走一段基線,洗掉剩余物。
  9、關(guān)機(jī)時(shí),先關(guān)計(jì)算機(jī),再關(guān)液相色譜。

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