一、實驗原理

毛細管電泳是離子或荷電離子以電場為驅動力，在毛細管中根據(jù)淌度或/和分配系數(shù)的差異進行快速分離的一種電泳技術。毛細管電泳和傳統(tǒng)電泳的根本區(qū)別在于前者設法使電泳過程在散熱效率*的毛細管內進行，從而可以引入高的電場強度，*分離質量。

電泳時，毛細管內部首先充滿分離緩沖溶液，樣品從毛細管的一端導入，當毛細管兩端加上一定的電壓后，荷電溶質便朝與其極性相反的電極方向移動，由于樣品各組分間淌度不同，引起遷移速度的差異，因而經過一定時間后，各組分按其淌度大小順序，依次到達檢測器被檢出，得到按時間分布的電泳圖譜。

本實驗系采用無膠篩分原理分離SDS-蛋白質復合物，并用于蛋白質的相對分子質量測定，電泳分離SDS-蛋白質及測定相對分子質量的原理。無膠篩分是在常規(guī)CGE技術基礎上發(fā)展起來的，后者與傳統(tǒng)的平板凝膠電泳分離的原理無異，都是根據(jù)分子的大小分離。我們知道，凝膠篩分介質是指以化學交聯(lián)方式形成的膠狀多孔物質，一旦成型，即很難改變，如聚丙烯酰胺。所謂無膠篩分介質是由纏繞的聚合物以物理方式組成的分離介質 ，如線形聚丙烯酰胺、纖維素衍生物等，在溶液中形成一定大小的動態(tài)孔徑，在CGE中，凝膠毛細管柱制備困難，壽命短，進樣易堵塞等缺點，在CE的應用受到很大限制。而采用低粘度的線性聚合物溶液代替高粘度的交聯(lián)聚合物，可克服上述缺點，其物理參數(shù)可通過線性聚合物的種類、濃度等予以調節(jié)，而且每次分離后毛細管中的篩分緩沖液都要重新更換，因此，重現(xiàn)性很高。

目前，無膠篩分技術已廣泛用于分離寡核甘酸、核酸片段、PCR產物，DNA測序以及分離SDS-蛋白質復合物，后者已成為鑒定蛋白質純度和測定蛋白質相對分子質量的一個重要手段。

二、實驗用品

（一）器材

（1）毛細管電泳儀。

（2）微型離心機。

（3）恒溫水浴鍋

（二）試劑  

（1）CE-SDS蛋白樣品緩沖液。

（2）0.1mol/L NaOH。   

（3）0.1mol/L HCL。

（4）CE-SDS蛋白電泳緩沖液。

（5）CE-SDS內標（1mg/mL苯甲酸）。

（6）CE-SDS蛋白標準：包括8種蛋白（20mg/mL）。

（三）材料

電泳純的牛血清白蛋白、卵蛋白溶菌酶和細胞色素C。

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