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蛋白提取
組織樣本總蛋白提?。ㄐ∈蟾谓M織)
1、頸椎脫臼處死小鼠,75%乙醇擦拭皮膚,剪開腹腔,剪切肝臟組織。
2、平皿中放入6ml預(yù)冷0.9%NaCL。
3、稱取0.6g左右肝組織,在平皿中剪碎組織,并轉(zhuǎn)移到勻漿器。
4、預(yù)冷裂解液中添加PMSF(20ug/2ml)。
5、取2ml預(yù)冷裂解緩沖液,迅速加入勻漿器,冰浴條件下充分研磨。
6、組織研磨液轉(zhuǎn)移至1.5ml離心管。
7、4℃,15000rpm,離心10min。
8、取上清組織蛋白粗提取液至新的1.5ml離心管。
9、進行蛋白定量,-80℃保存。
蛋白提取
組織樣本總蛋白提?。ㄐ∈蟾谓M織)
1、頸椎脫臼處死小鼠,75%乙醇擦拭皮膚,剪開腹腔,剪切肝臟組織。
2、平皿中放入6ml預(yù)冷0.9%NaCL。
3、稱取0.6g左右肝組織,在平皿中剪碎組織,并轉(zhuǎn)移到勻漿器。
4、預(yù)冷裂解液中添加PMSF(20ug/2ml)。
5、取2ml預(yù)冷裂解緩沖液,迅速加入勻漿器,冰浴條件下充分研磨。
6、組織研磨液轉(zhuǎn)移至1.5ml離心管。
7、4℃,15000rpm,離心10min。
8、取上清組織蛋白粗提取液至新的1.5ml離心管。
9、進行蛋白定量,-80℃保存。
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