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中級(jí)會(huì)員 | 第6年

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人胃癌高轉(zhuǎn)移模型

時(shí)間:2022/5/14閱讀:914
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胃癌高轉(zhuǎn)移模型的建立可以:(1)研究腫瘤轉(zhuǎn)移機(jī)制;(2)研究腫瘤防治;(3)為腫瘤轉(zhuǎn)移研究提供更為理想的動(dòng)物模型。


腫瘤組織塊原位移植法


實(shí)驗(yàn)方法原理    

     

用人胃癌組織塊SGC-7901 原位移植于SCID小鼠,第4周末移植瘤向淋巴結(jié)和肝臟等器官轉(zhuǎn)移, 轉(zhuǎn)移率達(dá)66. 7% (2/3) ,第周末轉(zhuǎn)移率高達(dá)* (10/ 10) 。


實(shí)驗(yàn)材料         


雄性SPF級(jí)SCID小鼠人胃癌組織SGC-7901


試劑、試劑盒         


水合氯醛福爾馬林液


儀器、耗材     


飼養(yǎng)籠光學(xué)顯微鏡石蠟


實(shí)驗(yàn)步驟       

 

一、實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備

 

1.  雄性SPF 級(jí)SCID 小鼠,6周齡, 體重2025g 。

 

2.  裸小鼠皮下傳代的人胃癌組織( SGC-7901,低分化腺癌。

 

二、胃癌高轉(zhuǎn)移模型建立

 

1.  SCID 小鼠25 只, 隨機(jī)分為試驗(yàn)組( n= 15) 和正常對(duì)照組( n= 10) 

 

2.  試驗(yàn)組動(dòng)物原位移植人胃癌組織SGC-7901:用4. 3%水合氯醛將動(dòng)物麻醉后,依次切開(kāi)左上腹皮膚、腹壁和腹膜, 仔細(xì)暴露胃壁,在胃大彎中部用剪刀損傷胃漿膜層直徑約3 mm),用絲線將人胃癌組織塊5 mm×7 mm,重量為150 mg ) 縫在損傷處,然后將胃送入腹腔內(nèi), 用號(hào)縫線依次縫合腹壁和皮膚。

 

3.  術(shù)后觀察動(dòng)物麻醉情況,直至全部動(dòng)物清醒后,送至飼養(yǎng)室。

 

4.  正常對(duì)照組不作處理。


5.  手術(shù)后第2、4、周末分別隨機(jī)處死試驗(yàn)組動(dòng)物2、3、只, 發(fā)現(xiàn)第周末只動(dòng)物的癌腫均已轉(zhuǎn)移,故余下SCID 小鼠也于第周末處死。

 

6.  取胃局部生長(zhǎng)的腫瘤組織、腫大淋巴結(jié)、腦, 及胸腔、腹腔內(nèi)臟器, 以10% 福爾馬林液固定,石蠟包埋,常規(guī)制片,HE 染色,光學(xué)顯微鏡下觀察并記錄腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移情況。

 

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