實(shí)驗(yàn)簡介
細(xì)胞轉(zhuǎn)染是指將外源分子如DNA、RNA等導(dǎo)入真核細(xì)胞的技術(shù)。主要包括:電穿孔法、顯微注射、 基因槍、磷酸鈣其沉淀法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法、病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染等，理想的轉(zhuǎn)染方法是具有高轉(zhuǎn)染效率、對(duì)細(xì)胞毒性作用小等。其中脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是常用的簡便轉(zhuǎn)染方法。
細(xì)胞感染是指通過病毒載體將外源分子導(dǎo)入真核細(xì)胞。病毒可以通過自身的侵襲作用進(jìn)入宿主細(xì)胞后，可以利用細(xì)胞中的物質(zhì)和能量以及復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)譯的能力，按照自身核酸所包含的遺傳信息產(chǎn)生和它樣的新一代病毒。 利用這種特性，去掉病毒的致毒基因并將外源基因片段插入制成病毒載體，進(jìn)而將目的片段轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞，使目的基因可以表達(dá)，甚至將基因遺傳給后代穩(wěn)定的表達(dá)。目前常見用于轉(zhuǎn)染的病毒有，慢病毒，逆轉(zhuǎn)錄病毒，腺病毒等。