抗原修復(fù)鍋的使用

抗原修復(fù)鍋(Antigen Retriever)

    免疫組織化學(xué)方法成功與否關(guān)鍵在于抗原決定簇的保存和暴露。組織經(jīng)甲醛固定，甲醛的醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián),使決定簇的構(gòu)像改變，從而影響檢測蛋白表達(dá)。要充分暴露抗原決定簇，通常用到抗原修復(fù)鍋。強(qiáng)烈推薦EMS有競爭力的一款產(chǎn)品，適于甲醛固定的組織經(jīng)石蠟包埋后進(jìn)行免疫染色前的處理，配合特別的抗原修復(fù)緩沖液確保得到zui高質(zhì)量的免疫染色效果。

• 一次可以在6種不同緩沖液中運(yùn)行，進(jìn)行抗原暴露
  • 僅暴露抗原決定簇，不損傷組織的形態(tài)
  • 實(shí)驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定，結(jié)果重現(xiàn)性高
  • 系列的玻片在獨(dú)立環(huán)境中經(jīng)過處理

抗原修復(fù)鍋怎樣工作？

    看上去，抗原修復(fù)鍋似我們烹飪的高壓鍋。這是一款功能*的“高壓鍋”，主要用于抗原暴露的工作，主要的工作原理也是裝玻片的幾個(gè)分室可以達(dá)到高溫(>120°C)高壓。靈敏的傳感控制器來保持一定的溫度和壓力及一定的時(shí)間，這些工作參數(shù)都是經(jīng)過嚴(yán)格的科學(xué)實(shí)驗(yàn)得到的數(shù)據(jù)。當(dāng)達(dá)到需要的溫度，抗原修復(fù)鍋會(huì)在該溫度下保持幾分鐘，之后鍋內(nèi)玻片被冷卻2個(gè)多小時(shí)，特殊設(shè)材質(zhì)的內(nèi)鍋體控制了鍋和玻片的冷卻速度。

誰是受益人？

• 研究病理的實(shí)驗(yàn)室，那里需要高質(zhì)量染色圖片（用來發(fā)表）的工作人員
• 缺乏技術(shù)人員的實(shí)驗(yàn)室，學(xué)生和博士后均可以處理玻片進(jìn)行組織染色，且不需要很多時(shí)間來摸索
• 小型病理實(shí)驗(yàn)室，每天處理的玻片數(shù)量有限
• 樣本昂貴稀有，或如組織芯片，或如*的組織樣本，利用抗原修復(fù)鍋，簡單可靠

怎樣選擇一種緩沖液（Buffer）？

    如果你已經(jīng)知道哪種緩沖液用在微波的某種組織抗原修復(fù)，那么用抗原修復(fù)鍋時(shí)，這種緩沖液也同時(shí)適用的機(jī)會(huì)很大。我們提供四種即用型緩沖液R-Buffer A/B/C/U，同時(shí)也提供同種更加溫和的組織處理緩沖液，我們稱之為G系列，R-Buffer AG/BG/CG/UG。

    選擇Buffer，主要考慮以下兩點(diǎn)：

1.  抗原的自然特性以及所選擇的抗體

抗原自身特性和抗原的位置都是首要考慮。我們建議你剛開始的時(shí)候選擇抗原表達(dá)環(huán)境的zui適Buffer。以下是經(jīng)驗(yàn)供大家參考：

Most of the nuclear antigens (apoptosis-related, survival-related, proliferation-related) R: Buffer A (or AG).

Cell adhesion molecules, cell membrane antigens (extracellular domain) R: Buffer A (or AG)

Cytoskeleton and cytoskeleton-associated molecules – R:Buffer A (or AG)

Intracellular domain of some adhesion molecules and surface receptors – R:Buffer B (or BG)

Intracellular domain of some adhesion molecules and surface receptors – R:Buffer C (or CG)

Most of antibodies raised against a linear peptide – R: Buffer U (or UG)

2.  固定液以及固定程度

建議的組織切片的抗原修復(fù)處理是一種針對(duì)普通的適化狀態(tài)切片。如果用來切片的組織塊沒有充分固定，或者過固定（留在福爾馬林溶液中時(shí)間過長），或者用了其它的固定液，那么，處理組織切片的流程方案需要重新修訂，zui便利的辦法是選擇使用G系列緩沖液。對(duì)于過固定的材料一般推薦用U buffer，或者在同一Buffer里面增加循環(huán)。

產(chǎn)品參數(shù)：

使用抗原修復(fù)鍋進(jìn)行染色的效果示例

1.福爾馬林固定，石蠟包埋，人乙狀結(jié)腸組織切片，經(jīng)抗原修復(fù)鍋進(jìn)行抗原暴露，R-Buffer C (pH 6.0)，組織玻片降溫過夜，抗體MIB-1，抗原Ki-67，R-Detect HRP系統(tǒng)染色

2.福爾馬林固定，石蠟包埋，人乙狀結(jié)腸組織切片，經(jīng)抗原修復(fù)鍋進(jìn)行抗原暴露，R-Buffer A (pH 8.1)，組織玻片降溫過夜，抗體#4B11，抗原CD8 (cell membrane)，R-Detect HRP系統(tǒng)染色。