JANUS G3自動(dòng)化PCR體系構(gòu)建工作站幫你解決重重困難

PCR技術(shù)已應(yīng)用到生物制藥領(lǐng)域的各個(gè)環(huán)節(jié)從前期研發(fā)階段后選序列的篩選，到工藝開發(fā)環(huán)節(jié)穩(wěn)健方法的建立，至生產(chǎn)放行的把控。每一個(gè)環(huán)節(jié)都需要倚仗PCR技術(shù)的結(jié)果作為衡量的依據(jù)。諸如支原體，宿主DNA，內(nèi)外源性病毒，逆轉(zhuǎn)錄病毒等風(fēng)險(xiǎn)因子都要求在生產(chǎn)起始、中間過(guò)程和終產(chǎn)品階段，進(jìn)行定性或定量PCR分析，以確保風(fēng)險(xiǎn)因子可控。對(duì)CART，TCRT，CAR-NK等細(xì)胞治療產(chǎn)品而言，CAR/TCR基因拷貝數(shù)，RCR/RCL復(fù)制型慢病毒檢測(cè),轉(zhuǎn)染效率等也都是必需的PCR檢測(cè)項(xiàng)目。

PCR體系構(gòu)建中經(jīng)常遇到的問(wèn)題

• 一個(gè)樣品多項(xiàng)目檢測(cè)，體系構(gòu)建相當(dāng)復(fù)雜（多引物、探針、酶、dNTP、模板和Mg2+，緩沖液）在過(guò)程中易出現(xiàn)加樣錯(cuò)誤；

• 操作繁瑣但定量結(jié)果判定又很嚴(yán)：標(biāo)曲R2大于0.98，擴(kuò)增效率介于90-110，低標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)Ct不高于39。一旦結(jié)果不達(dá)標(biāo)，又消耗人力重新開展實(shí)驗(yàn)；

• RCL檢測(cè)出現(xiàn)假陽(yáng)性，無(wú)模板的陰性對(duì)照（No Template Control，簡(jiǎn)稱 NTC）NTC也由于污染造成假陽(yáng)性；

• 每日樣品及樣品量不一樣，需要跟進(jìn)樣品量調(diào)整孔板加樣的位置；

• 由于沒(méi)有數(shù)據(jù)追蹤，結(jié)果失敗卻很難排查錯(cuò)誤原因；

• 不同實(shí)驗(yàn)員不同時(shí)間重復(fù)性差。

如圖所示，CART免疫產(chǎn)品質(zhì)控中，定量PCR構(gòu)建體系。（放大）

所以大家都在尋找一個(gè)極易上手、高效快速構(gòu)建各類高精度反應(yīng)體系，且能標(biāo)準(zhǔn)化的試驗(yàn)結(jié)果。珀金埃爾默（PerkinElmer）公司推出的新一代JANUS G3 自動(dòng)化PCR體系構(gòu)建工作站就是一個(gè)不錯(cuò)的解決方案?？蓾M足的應(yīng)用包括DNA/RNA的提取、純化；DNA/RNA 濃度均一化；PCR 和測(cè)序產(chǎn)物純化；PCR 反應(yīng)板的建立(PCR, RT-PCR, Real Time PCR)等相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

JANUS G3自動(dòng)化PCR體系構(gòu)建工作站 （放大）

JANUS G3自動(dòng)化PCR體系構(gòu)建工作站以其穩(wěn)固的性能，靈活的配置，簡(jiǎn)便人性化軟件操作，正在逐步瓦解諸多手工操作遇到的難題。

JANUS G3 PCR體系工作站特質(zhì)

一、消除實(shí)驗(yàn)誤差，提高實(shí)驗(yàn)精度，重復(fù)性好

在PCR和qPCR加樣過(guò)程中，尤其在配置96孔或者384孔反應(yīng)板時(shí)，采用高通量高精度的自動(dòng)化PCR構(gòu)建體系，可以避免在高壓工作下人工疲勞操作帶來(lái)的不均一性，減小實(shí)驗(yàn)誤差，并提高樣本處理效率。

1. JANUS G3自動(dòng)化PCR體系構(gòu)建工作站具有AccuSense液面感應(yīng)技術(shù)，每通道獨(dú)立移液器均可以的進(jìn)行液面探測(cè)，吸頭總是接觸液面下1-3mm，確保能吸到樣品，同時(shí)盡量避免液體吸附到吸頭外側(cè)臂；確保的移液精度，減少樣品吸附殘留。兼容的電離液和非電離液，包括有機(jī)溶液（如DMSO，甲醇）。減少交叉污染，確保數(shù)據(jù)完整性。

固定鋼針或者吸頭可探測(cè)或追蹤液面位置 （放大）

如圖一所示：微量體積移液時(shí)，在不同移液體積下，CV值的波動(dòng)極小，重復(fù)性佳。

圖一：微量體積移液的重復(fù)性和穩(wěn)定性 （放大）

如圖二所示：大體積移液時(shí)，性均大于99%，CV波動(dòng)性更小。自動(dòng)化PCR體系構(gòu)建工作站移液范圍是0.5ul-5000ul。

圖二：大體積移液的重復(fù)性和性 （放大）

2. 基于系統(tǒng)液的液相驅(qū)動(dòng)移液技術(shù)，一方面確保高精度移液，另一方面也避免了氣溶膠的污染（因可用系統(tǒng)液對(duì)整個(gè)液體管道和一次性吸頭適配器進(jìn)行清洗）。在大部分的案例中，都能避免使用昂貴的帶濾芯的吸頭，而只用正常的標(biāo)準(zhǔn)吸頭。

二、靈活性突出，適用于復(fù)雜多變的應(yīng)用場(chǎng)景

1. 移液分液靈活選擇

Varispan具有4通道或者8通道移液臂，可獨(dú)立探測(cè)液面并在Z軸獨(dú)立運(yùn)動(dòng)。各通道移液器之間的間距可自動(dòng)調(diào)整，可操作試管、微孔板、深孔板和試劑瓶。同一移液臂，可進(jìn)行靈活的多通道移液，提高了工作效率。以8通道移液臂為例，進(jìn)行96 PCR板體系構(gòu)建，只需不到10分鐘，即可快速完成實(shí)驗(yàn)。相比手工操作，實(shí)驗(yàn)通量更高，也避免加樣錯(cuò)誤的發(fā)生。

2. 可整合和擴(kuò)展性

移板機(jī)械臂可同時(shí)整合循環(huán)擴(kuò)增儀。微孔板放入、移出循環(huán)儀、微孔板移動(dòng)到振蕩器、冷熱溫控、離心機(jī)等都可以實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。

三、簡(jiǎn)便易用且功能強(qiáng)大的操作軟件WinPREP

1. 預(yù)定義的實(shí)驗(yàn)器具，簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)程序的建立；具有用戶使用向?qū)?，可指?dǎo)用戶收集相關(guān)實(shí)驗(yàn)器具和試劑及位置擺放，儀器維護(hù)等。減少客戶對(duì)自動(dòng)化的恐懼，實(shí)驗(yàn)過(guò)程能被快速啟動(dòng)和運(yùn)行。節(jié)省更多的時(shí)間，確保實(shí)驗(yàn)順利運(yùn)行，獲得更好地實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和穩(wěn)定性，這對(duì)于新的用戶尤其重要。

2. WinPREP 軟件具備調(diào)用應(yīng)用程序、追蹤樣品制備過(guò)程，以及整合輔助設(shè)備的能力，以實(shí)現(xiàn)全自動(dòng)化應(yīng)用解決方案，滿足樣品在處理過(guò)程中的可追溯，可記錄。

3. 符合 21 CFR Part 11 相關(guān)法規(guī)規(guī)范，只有授權(quán)用戶才可以訪問(wèn)設(shè)備，數(shù)據(jù)從生成的那一刻起自動(dòng)保護(hù)，滿足數(shù)據(jù)安全性和溯源性要求。

兩個(gè)型號(hào)供您選擇

JANUS G3 自動(dòng)化PCR體系構(gòu)建工作站實(shí)現(xiàn)靈活的無(wú)人看守的PCR反應(yīng)建立, 減少技術(shù)人員的動(dòng)手時(shí)間，減少人為錯(cuò)誤，提高實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性和重復(fù)性；同時(shí)也大大提高了工作通量和質(zhì)量。相信在不久的將來(lái)，JANUS G3 自動(dòng)化PCR體系構(gòu)建工作站能夠在越來(lái)越多的應(yīng)用中釋放能量，助力整個(gè)生物制藥產(chǎn)業(yè)逐步邁向自動(dòng)化的進(jìn)程。