手機版
化工儀器網(wǎng)手機版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關(guān)注視頻號
實時熒光定量PCR (RT-qPCR) 是一種用于實時擴增和檢測特定 DNA 或 RNA 序列的分子生物學(xué)技術(shù)。該方法利用熒光染料或探針，當與擴增的 DNA 或 RNA 分子結(jié)合時會發(fā)出信號，從而可以對目標序列進行量化。RT-qPCR 通常用于基因表達分析、病毒載量定量和基因突變檢測等應(yīng)用。
實時熒光定量PCR是利用熒光信號的變化，實時檢測PCR擴增反應(yīng)中每一個循環(huán)擴增產(chǎn)物量的變化，通過Ct值和標準曲線的分析對起始模板進行定量分析。
1．擴增曲線
在實時熒光定量PCR進程中，通過熒光定量PCR儀，在PCR每個循環(huán)進行一次熒光信號的收集，以熒光強度為縱軸，循環(huán)次數(shù)為橫軸，所得到的曲線稱為PCR的擴增曲線。
2．熒光閾值
實時熒光定量PCR的前面十多個循環(huán)，熒光強度變化不大，熒光強度的平均值可稱為基線值，在基線值的基礎(chǔ)上，增加一定數(shù)量后得到一熒光值，這一點后，隨著循環(huán)次數(shù)的增加，熒光強度明顯增強，因此稱該值為熒光閾值。一般取PCR反應(yīng)的前15個循環(huán)的熒光信號作為熒光本底信號。
3．Ct值與標準曲線
Ct值是指PCR擴增過程中，擴增產(chǎn)物的熒光信號達到設(shè)定的閾值時所經(jīng)過的擴增循環(huán)次數(shù)。實驗發(fā)現(xiàn)，Ct值與反應(yīng)管內(nèi)的模板數(shù)密切相關(guān)，起始拷貝數(shù)越多，Ct值越小。
相關(guān)產(chǎn)品
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權(quán)行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負版權(quán)等法律責任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購中心