應(yīng)用指南—puriFlash® 5.250 + iELSD 實(shí)現(xiàn)對(duì)活性藥物成分的高通量純化！

純化是藥物開發(fā)的關(guān)鍵步驟，從分析到放大再到工藝，純化和鑒定是將藥物推向市場(chǎng)的重要步驟。因此必須有一個(gè)高通量的解決方案，以提供足夠量的純化化合物。而 Advion Interchim Scientific 制備色譜系統(tǒng)可以輕松實(shí)現(xiàn)活性藥物成分(API)與其雜質(zhì)的分離，達(dá)到純化的目的。

案例分享

使用AIS puriFlash®5.250制備系統(tǒng)，對(duì)非處方藥(OTC)中的五種活性成分進(jìn)行了純化，包括Caffeine、格拉法寧、酮洛芬、黃酮和非諾貝特（圖1），同時(shí)使用expression® CMS小型臺(tái)式質(zhì)譜儀同步確認(rèn)化合物ID。

1.Caffeine：Caffeine是一種具有興奮作用的天然化學(xué)物質(zhì)，存在于咖啡、茶、可可等中。

2.格拉芬寧：格拉芬寧是一種非甾體抗炎藥(NSAID)，由于過敏反應(yīng)的高風(fēng)險(xiǎn)，1991年撤出市場(chǎng)。

3.酮洛芬：一種非甾體抗炎藥(NSAID)，酮洛芬用于治療炎癥、腫脹、僵硬和關(guān)節(jié)疼痛。由于增加了心臟病發(fā)作、中風(fēng)、刺激和其他問題的風(fēng)險(xiǎn)，該藥于1995年停產(chǎn)。

4.黃酮：植物中普遍存在的一種代謝物。

5.非諾貝特：一種處方藥，用于降低和治療血液中的高膽固醇和甘油三酯（類脂物質(zhì)）水平。

實(shí)驗(yàn)過程

LC分析條件

流動(dòng)相A：Water + 0.1% TFA

流動(dòng)相B：Acetonitrile

色譜柱：Aquity UPLC BEH C18 1.7μm, 50x2.1mm ID 

流速：1mL/min

上樣方式：液體上樣

上樣量：1μL

檢測(cè)波長(zhǎng)：UV254nm

洗脫條件

LC分離結(jié)果

制備條件

系統(tǒng)：puriFlash® 5.250+iELSD 

流動(dòng)相A：Water

流動(dòng)相B：Acetonitrile

色譜柱：US5C18HQ-150/300 

流速：32mL/min

上樣方式：液體上樣

上樣量：0.5mL

粗樣：50mg 

洗脫條件

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

下圖分別顯示了UV Scan (綠色)，ELSD (35°C) (藍(lán)色)，TIC 160-500m/z，XIC 371-374 m/z，XIC 220-224m/z (紫色)的數(shù)據(jù)圖，可以看到五種物質(zhì)得到了很好的分離，并在質(zhì)譜上進(jìn)行了確認(rèn)。

結(jié)論

1、    Advion Interchim Scientific expression®CMS 小型臺(tái)式質(zhì)譜儀對(duì)分離得到的化合物進(jìn)行鑒定，可以快速、準(zhǔn)確地識(shí)別出感興趣的化合物。

2、   Advion Interchim Scientific采用集成式iELSD與puriFlash® 5.250純化制備系統(tǒng)為一體，可實(shí)現(xiàn)無紫外吸收的樣品的檢測(cè)。