免疫組化中抗體的加入

免疫組化中抗體的加入

這看似很簡(jiǎn)單的問(wèn)題，如果處理不好也可導(dǎo)致不同的結(jié)果，如果應(yīng)用自動(dòng)免疫組織化學(xué)染色儀，將程序輸入即可，

如為手工操作，就必須注意以下的問(wèn)題：

1.當(dāng) PBS 沖洗完畢后，在加入抗體，如一抗，二抗或三抗。必須將存留于切片上的多余的PBS 摔干，但不能讓切片干涸，切片干涸，往往可產(chǎn)生非特異性染色，切片上PBS 存留過(guò)多，將會(huì)稀釋加入的抗體，影響加入抗體的濃度，同時(shí)也將影響最后的結(jié)果，如假陰性等。

2.加入的抗體以一滴為佳。當(dāng)擦干組織塊周邊多余的 PBS 后，切片保持著一定的濕潤(rùn)度，此時(shí)加入另外的抗體為最佳時(shí)候，滴入抗體以一滴 50ml 為好，加入后，輕微地?fù)u勻地覆蓋于切片上，使最后的結(jié)果穩(wěn)定均衡，不至于有的地方有反應(yīng)，有的地方無(wú)反應(yīng)。

3.切片沒(méi)擦好將會(huì)影響加入抗體的質(zhì)量，切片沒(méi)沖洗干凈，沒(méi)擦試好，當(dāng)加入抗體后，它可縮于切片的一邊，此時(shí)你為了使加入的抗體能夠地覆蓋整個(gè)切片，便會(huì)使勁地加入抗體，此時(shí)的結(jié)果是，抗體依然滑向一邊，或者露出，這不光沒(méi)達(dá)到目的，還浪費(fèi)抗體，正確的做法就是地用 PBS 沖洗，摔干切片擦干切片周邊的 PBS，再滴入一滴抗體輕輕搖勻即可。