細(xì)胞染色的方式

細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)后，需要對(duì)其生長(zhǎng)情況、形態(tài)甚至生物學(xué)性狀進(jìn)行觀察。由于細(xì)胞小而復(fù)雜，若不借助適當(dāng)?shù)氖侄?，難以觀察其形態(tài)、結(jié)構(gòu)，更難發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)各種組分的分子組成及功能。目前，已有多種研究細(xì)胞的技術(shù)，從光學(xué)顯微鏡到電子顯微鏡，從一般細(xì)胞化學(xué)法到免疫化學(xué)法。細(xì)胞染色是研究細(xì)胞生物學(xué)特征的一種常用手段，然而，對(duì)于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)新手來(lái)說(shuō)，想要獲得一張漂亮的細(xì)胞染色圖并不容易。染色試劑不會(huì)選、細(xì)胞染色不均勻、染色時(shí)切片脫落等都是很常見(jiàn)的問(wèn)題。

細(xì)胞染色是生物學(xué)研究中常用的技術(shù)，它涉及到使用特定的染料或熒光探針來(lái)觀察和分析細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能。以下是一些常見(jiàn)的細(xì)胞染色方法和染料：

瑞氏染色（Wright's stain）

染液主要由堿性染料亞甲藍(lán)（美藍(lán)）和酸性染料伊red溶于甲醇配置形成。操作簡(jiǎn)單，染色時(shí)間短，對(duì)細(xì)胞質(zhì)成分及中性顆粒染色效果較好。染色效果較差，容易退色，對(duì)細(xì)胞核染色效果較姬姆薩染色法差。保存時(shí)間短，適用于臨時(shí)性檢驗(yàn)，如血涂片血細(xì)胞分析。

姬姆薩染色（Giemsa's stain）

染液主要由堿性染料天青色素、酸性染料伊red、甘油和甲醇配制而成。染色效果好，對(duì)細(xì)胞核和寄生蟲(chóng)等效果較好，染色后保存時(shí)間長(zhǎng)退色緩慢。染色時(shí)間較長(zhǎng)，成本比較高，對(duì)細(xì)胞質(zhì)成分及中性顆粒染色效果較差。適用于寄生蟲(chóng)檢測(cè)或需要長(zhǎng)期保存的標(biāo)本涂片。

瑞-姬氏染色（Wright- Giemsa's stain）

為復(fù)合染色法，結(jié)合了瑞氏染色和姬姆薩染色的優(yōu)點(diǎn)。染色時(shí)間短，染色效果好，成本比姬姆薩染色法低。不易退色，適用于臨時(shí)性寄生蟲(chóng)或血涂片等檢查。

巴氏染色（Papanicolaou stain）

染液主要由蘇木素、橘黃G6（含橘黃G、磷鎢酸等）、藍(lán)化液、EA50（含淡綠、伊red、乙酸、磷鎢酸等）或EA36（含淡綠、伊red、磷鎢酸等）組成。染色效果好，細(xì)胞著色鮮艷多彩、透明度好、胞質(zhì)顆粒和胞核結(jié)構(gòu)清晰。染色時(shí)間長(zhǎng)（>1h），染色步驟多且復(fù)雜。適用于脫落細(xì)胞學(xué)檢查、上皮細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞檢查。

蘇Wood Essence-伊red染色（Hematoxylin-eosin staining）

染液主要由堿性染料蘇Wood Essence和酸性染料伊red組成。染色效果穩(wěn)定，透明度好，層次清晰，細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)對(duì)比鮮明。不能顯示胞質(zhì)分化程度，細(xì)胞核極易過(guò)染，染色時(shí)間較長(zhǎng)（30-40min）。適用于組織病理學(xué)檢查、痰液涂片檢查等。

免疫組化染色（Immunohistochemical staining）

利用抗原抗體之間的特異性結(jié)合，用于研究細(xì)胞產(chǎn)物如分子、蛋白質(zhì)或糖蛋白的表達(dá)、定位、分布和遷移等。

熒光染色

使用熒光染料如Hoechst33258和Hoechst33342等，可以穿過(guò)活細(xì)胞膜與細(xì)胞核結(jié)合，在紫外光下將核染為藍(lán)色。

用于細(xì)胞核染色，可以區(qū)分活死細(xì)胞，但需要注意染色后盡快檢測(cè)，以避免熒光淬滅。