ELISA酶聯(lián)接免疫吸附劑測(cè)定實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品溶解稀釋流程

ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測(cè)定 ( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡(jiǎn)稱，是一種檢測(cè)方法，標(biāo)準(zhǔn)品是相對(duì)于具體的物質(zhì)有具體的標(biāo)準(zhǔn)品。ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線是結(jié)果計(jì)算的尺子，標(biāo)準(zhǔn)品是ELISA 實(shí)驗(yàn)成功與否的關(guān)鍵點(diǎn)。ELISA 實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品溶解稀釋流程：

1、粉末標(biāo)準(zhǔn)品短暫離心，讓因運(yùn)輸沾到管蓋、管壁的標(biāo)準(zhǔn)品沉到管底。
2、根據(jù)瓶標(biāo)簽加入一定體積的蒸餾水，加水后輕柔渦旋震蕩，室溫靜置溶解 10-30min，讓粉末全溶解。   
 注意：加水后暫不用移液槍吹吸，避免蛋白未溶解，槍頭帶出部分蛋白，待全溶解后可吹吸或渦旋振蕩混勻。
3、標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋:
（1）標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液的選擇：
若血清、血漿、組織勻漿樣本，用試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。若細(xì)胞上清樣本，建議用細(xì)胞培養(yǎng)基梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
（2）耗材準(zhǔn)備：
準(zhǔn)備8個(gè)1.5Ml離心管，寫上S1-S7、空白。
（3）梯度稀釋：
根據(jù)說(shuō)明書，每管加入等體積的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液（培養(yǎng)基）。吸取同體積溶解好的標(biāo)準(zhǔn)品到S1管中，吹打10次混勻，渦旋5S。從S1管中吸取同體積溶液到 S2管，吹打10次混勻，渦旋5s。同法稀釋S3-S7濃度。
（4）空白:
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液（培養(yǎng)基）作為空白即零濃度。注意：梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)，渦旋震蕩混勻后可短暫離心，讓到蓋子、壁上的液體到管底，再開始稀釋下個(gè)濃度。