行業(yè)應(yīng)用 | 動態(tài)酵母擴(kuò)培協(xié)議的在線監(jiān)測
APPLICATION REPORT | Fermentation & Maturation
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在釀造計劃不斷變化、停工和延遲的生產(chǎn)環(huán)境中,酵母的持續(xù)擴(kuò)培是一項(xiàng)挑戰(zhàn)?;谟嫊r器運(yùn)行的擴(kuò)培協(xié)議不靈活。它需要額外的外部實(shí)驗(yàn)室樣本和勞動力來糾正或調(diào)整擴(kuò)培協(xié)議。一種解決方案是使用在線傳感器,該傳感器提供準(zhǔn)確可靠的數(shù)據(jù),以根據(jù)規(guī)范控制和運(yùn)行進(jìn)行擴(kuò)培。波士頓啤酒公司(BBC)采用 “Pitch & Pull” 方法擴(kuò)培各種酵母菌株,即擴(kuò)培物在多次投遞后不會進(jìn)行 CIP,直到切換到另一種菌株。在這種情況下,在試用了多個傳感器后,波士頓啤酒公司成功測試了安東帕的傳感器,該傳感器符合所有預(yù)期,并決定在波士頓啤酒公司的所有地點(diǎn)安裝這些傳感器。
背景簡介
波士頓啤酒公司(BBC)在所有啤酒廠運(yùn)營著一個先進(jìn)的擴(kuò)培系統(tǒng),該系統(tǒng)于2013年至2016年間安裝。擴(kuò)培系統(tǒng)由Esau&Hueber(Schrobenhausen,GER)提供,以解決波士頓啤酒公司酵母管理的復(fù)雜性,它使用6種以上的標(biāo)準(zhǔn)和特殊酵母菌株。
擴(kuò)培空間占發(fā)酵罐全體積的10-15%,這意味著一個擴(kuò)培器提供了足夠的空間,可以為每個發(fā)酵罐投2-3批麥汁。無需延遲 Drauflassen 程序,可以連續(xù)添加麥汁,不會延遲。
“Pitch & Pull” 方法
波士頓啤酒公司采用了所謂的 “Pitch & Pull” 擴(kuò)培方法。進(jìn)入發(fā)酵罐的第一批麥汁以相應(yīng)的體積(發(fā)酵罐滿體積的 10-15%)投遞,而且還在擴(kuò)培器中留下10%的酵母擴(kuò)培體積。在第二次釀造,填充發(fā)酵罐的過程中,再次用新鮮的麥芽汁補(bǔ)充以繼續(xù)擴(kuò)培。根據(jù)酵母菌株和釀造節(jié)奏/需求,這種 “Pitch & Pull” 方法可以重復(fù)14-16次。由于系統(tǒng)的衛(wèi)生設(shè)計以及重新灌裝后的高活性酵母,到目前為止還沒有觀察到啤酒生物變質(zhì)的污染。
這種 “Pitch & Pull” 方法具有多種優(yōu)點(diǎn):
每個擴(kuò)培器每周可能多達(dá)6個完整的發(fā)酵器投遞(總共4個擴(kuò)培器=每周多達(dá)24個完整的擴(kuò)培器投遞)
酵母處于生長期(無滯后期),類似于 “Drauflassen”
高活性酵母在初始階段抑制任何潛在的啤酒破壞物
更少的勞動力(自動化和從實(shí)驗(yàn)室到小型的酵母培養(yǎng))
由于在沒有CIPs 的情況下持續(xù)擴(kuò)培,大幅減少了堿液、酸液和消毒劑的使用
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該系統(tǒng)根據(jù)保存的協(xié)議按菌株和所需的擴(kuò)培持續(xù)時間運(yùn)行。如上圖所示,具有三個階段的協(xié)議包含各種參數(shù),如溫度、時間、泵速和其他參數(shù),并賦予釀酒師能夠靈活地根據(jù)細(xì)胞計數(shù)和提取物來調(diào)整參數(shù)。還有其他參數(shù)保持不變,如空氣流速和背壓。
各種酵母菌株的擴(kuò)培方案是利用供應(yīng)物的輸入以及包括提取物、細(xì)胞計數(shù)/活力、pH 和其他因素在內(nèi)的多個概況制定的。這些協(xié)議為受控環(huán)境中的一致擴(kuò)培奠定了可靠的基礎(chǔ)。然而,重要的是要認(rèn)識到,生產(chǎn)環(huán)境差異很大,其特點(diǎn)是頻繁的時間表變化、釀造廠/麥芽汁延遲、不可預(yù)見的停機(jī)時間、麥芽汁成分和溫度的變化、不同的灌裝量、節(jié)假日等。
為了適應(yīng)這些動態(tài)條件,釀造人員經(jīng)常發(fā)現(xiàn)自己增加了實(shí)驗(yàn)室樣本或檢查的數(shù)量。這允許釀造人員調(diào)整協(xié)議并解決遇到的特定變化。然而,這種方法將擴(kuò)培控制轉(zhuǎn)變?yōu)橐粋€勞動密集型的過程,涉及釀酒人員和實(shí)驗(yàn)室人員。
動態(tài)協(xié)議轉(zhuǎn)換
為了尋找一種能夠使靜態(tài)協(xié)議適應(yīng)各種外部因素的解決方案,波士頓啤酒公司探索了不需要額外勞動力的選擇。達(dá)成的共識是,儲罐或在線傳感器的實(shí)施可以為實(shí)現(xiàn)能夠有效應(yīng)對不斷變化的條件的動態(tài)協(xié)議提供潛在手段。
在波士頓啤酒公司考慮的各種方法中,最有前途的是利用在線提取物測量。這種方法比通過濁度測定的細(xì)胞計數(shù)更可取,因?yàn)楹笳呖赡軙憩F(xiàn)出受麥芽汁質(zhì)量(如冷松露遺留)和由于漂浮作用而導(dǎo)致槽中缺乏均勻性等因素影響的顯著變化。
此外,“Pitch & Pull” 方法的起始細(xì)胞計數(shù)可能不同,這進(jìn)一步增加了可變性。
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另一方面,在線提取物測量表明與細(xì)胞計數(shù)有很強(qiáng)的相關(guān)性,如上圖所示。當(dāng)考慮到一定的生物質(zhì)量需要更低限度的提取物利用率時,這種相關(guān)性尤其相關(guān)。
因此,利用提取物測量似乎是實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確和一致結(jié)果的有效方法。
擴(kuò)培系統(tǒng)配備了一個再循環(huán)系統(tǒng),每個擴(kuò)培器已經(jīng)安裝了三個衛(wèi)生級傳感器外殼。
接下來,在單個擴(kuò)培器中對多個提取物傳感器進(jìn)行測試,以評估其準(zhǔn)確性、穩(wěn)健性、處理、校準(zhǔn)、成本以及與現(xiàn)有平臺的集成??偣矞y試了五種不同的傳感器。
研究發(fā)現(xiàn),其中兩個需要更頻繁的 CIPs 來保持準(zhǔn)確性,一個需要多次校準(zhǔn),另一個由于云數(shù)據(jù)管理的限制而無法集成到平臺中。最終,來自奧地利安東帕的第五個也是最后一個提取物傳感器成功滿足了我們的所有標(biāo)準(zhǔn)。
下圖顯示了在線提取物測量結(jié)果與實(shí)驗(yàn)室獲得的表觀提取物結(jié)果之間的比較。最初的測量結(jié)果已經(jīng)顯示出良好的相關(guān)性(用藍(lán)色圓點(diǎn)表示),但在一次校準(zhǔn)后,相關(guān)性進(jìn)一步改善(用橙色圓點(diǎn)表示)??紤]到這些數(shù)據(jù)來自不同的擴(kuò)培范圍(5 種不同的酵母菌株,具有各自的多種協(xié)議)。
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此外,我們觀察到與真實(shí)提取物的相關(guān)性更高,如下圖所示。盡管在沒有 CIP 工藝的情況下出現(xiàn)了各種各樣的
“Pitch & Pull” 以及麥芽汁質(zhì)量的變化(包括低至高重力、不同的塊菌負(fù)荷以及不同的細(xì)胞密度和溫度),但傳感器始終提供了可靠的結(jié)果。然而,重要的是要注意,從在線提取物傳感器獲得的值不能在一對一的基礎(chǔ)上直接與實(shí)驗(yàn)室測量值進(jìn)行比較。
測量的表觀提取物濃度的差異可歸因于在線傳感器(在我們的情況下為折射率和無過濾)和實(shí)驗(yàn)室設(shè)備(在我們情況下為具有樣品過濾的密度)所采用的基本測量原理和樣品處理。
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合并提取物值
對提取物數(shù)據(jù)的依賴提供了擴(kuò)培器當(dāng)前狀態(tài)的可靠說明,特別是在使用一致的麥芽汁質(zhì)量時,特別是相對于原始重力,但需要額外考慮,以確定將這些提取值納入方案的最佳方法。
例如,對于 12°P 和15°P 的麥芽汁,10.0%的提取物值是不同的。15°P 的麥芽汁具有顯著更高的細(xì)胞計數(shù),這是由于原始重力和當(dāng)前提取物之間的提取物差異更大。捕捉這種差異的最佳方法是使用真實(shí)發(fā)酵度(RDF),使用真實(shí)提取物(RE)用這個簡單的公式表示:
DF (%) = ( 在擴(kuò)培器滿時 RE ? 當(dāng)前 RE ) ÷ 在擴(kuò)培器滿時 RE
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如上圖所示,實(shí)現(xiàn) RDF 顯著提高了與實(shí)驗(yàn)室測量的相關(guān)性。因此,為了增強(qiáng)擴(kuò)培協(xié)議的動態(tài)特性,“Hours” 參數(shù)已被基于在線提取物傳感器實(shí)時數(shù)據(jù)的 RDF 參數(shù)所取代。這種調(diào)整使得能夠?qū)U(kuò)培過程進(jìn)行更精確和適應(yīng)性更強(qiáng)的控制。
在使用的12個月里,只有一次提取物讀數(shù)偏離了預(yù)期結(jié)果。在6周的 “Pitch & Pull” 方法后,折射儀棱鏡上覆蓋著殘留物,導(dǎo)致穩(wěn)定的假的偏高提取物讀數(shù)。安東帕建議在傳感器的另一側(cè)使用導(dǎo)流板。通過這種方式,液體被導(dǎo)向傳感器,確保棱鏡的連續(xù)機(jī)械“清潔”,并防止任何涂層的積聚。從那時起,沒有觀察到任何偏差,波士頓啤酒公司決定為剩余的擴(kuò)培器配備安東帕的在線提取物監(jiān)控器。目前,波士頓啤酒公司正在對不同菌株的各種協(xié)議進(jìn)行微調(diào),以便在所有擴(kuò)培器都配備了提取監(jiān)測器后,將協(xié)議落實(shí)到位。
酵母的有氧監(jiān)測
下一步微調(diào)擴(kuò)培協(xié)議是充氣制度,目標(biāo)如下:
確保每個階段都有足夠的氧氣供應(yīng),以支持酵母增加生物量和麥角甾醇的形成,麥角甾醇對細(xì)胞壁的發(fā)育至關(guān)重要
通過消除擴(kuò)培器中的二氧化碳來創(chuàng)造一個有氧環(huán)境,以減少酵母的毒性應(yīng)激
波士頓啤酒公司提出了兩個問題:
我們是否可以通過在線氧含量測量來控制充氣,并且需要達(dá)到一定的氧含量才能高效擴(kuò)培?
還是通過嘗試實(shí)現(xiàn)盡可能低的 CO2 含量,CO2 含量是一個更可靠的值?
為此,安東帕的光學(xué)溶解 CO2 傳感器和光學(xué)溶氧傳感器已添加到已安裝的提取物傳感器旁邊的再循環(huán)管線中。
Carbo 6300 是一款基于衰減全反射(ATR)原理的免維護(hù)和EHEDG 認(rèn)證的溶解 CO2 傳感器,而 Oxy 5100 是一種基于熒光相移原理的在線 EHEDG 驗(yàn)證的氧傳感器。為了防止殘留層,如前所述,在 Carbo 6300 和 Oxy 5100 傳感器的對面安裝了導(dǎo)流板。
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上圖顯示了在10天的擴(kuò)培時間框架內(nèi),通過3次 “Pitch & Pull”活動,各自的二氧化碳水平,而目前關(guān)于氧含量結(jié)果的發(fā)現(xiàn)仍然沒有結(jié)論。波士頓啤酒公司和安東帕都在積極探索將氧含量測量納入擴(kuò)培協(xié)議的方法中。
CO2 值一致地表明存在三個不同的 "Pitch & Pull" 循環(huán),初始擴(kuò)培發(fā)生在潛伏期之后。在每次擴(kuò)培過程中,由于充滿了麥芽汁,CO2 水平最初很低。然后濃度增加,直到達(dá)到最大值。在達(dá)到最大值后,由于階段3中較低的酵母活性、較強(qiáng)的充氣和較低的溫度,CO2 水平降低。
從這些剖面中獲得的見解有助于將擴(kuò)培器中的 CO2 濃度降至更低,并有助于優(yōu)化充氣協(xié)議。
結(jié)論
安東帕的 L-Rix 5100 提取物監(jiān)測儀在波士頓啤酒公司的擴(kuò)培系統(tǒng)中進(jìn)行了成功的測試,顯示了實(shí)驗(yàn)室中在線提取物測量和外部測量提取物之間的強(qiáng)相關(guān)性。它證明了可靠性和穩(wěn)健性,能夠在不清洗儲罐的情況下長時間使用,并能適應(yīng)多種擴(kuò)培。
波士頓啤酒公司正在使用基于監(jiān)測儀提供的提取物值計算的 RDF 從靜態(tài)擴(kuò)培協(xié)議過渡到動態(tài)協(xié)議。RDF 在 “Pitch & Pull”機(jī)制中特別有價值,可以預(yù)測最小細(xì)胞計數(shù)并自適應(yīng)地控制擴(kuò)培,以一致地實(shí)現(xiàn)目標(biāo)細(xì)胞計數(shù)。
使用來自安東帕的溶解氧和溶解 CO2 傳感器進(jìn)行測試。雖然目前溶解氧的結(jié)果仍不確定,但監(jiān)測 CO2 顯示出不同的模式,使其適合于優(yōu)化充氣協(xié)議。
接下來,波士頓啤酒公司將利用提取物和二氧化碳傳感器的數(shù)據(jù)來微調(diào)酵母協(xié)議。通過實(shí)施更一致、更有效的擴(kuò)培,包括每周增加投遞次數(shù),波士頓啤酒公司的目標(biāo)是在投遞次數(shù)和發(fā)酵時間上實(shí)現(xiàn)更大的一致性。
產(chǎn)品簡介
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安東帕的 L-Rix 5100 是一種可直接浸入生產(chǎn)液中的在線折光儀。它提供提取物濃度和溫度的連續(xù)測量,能夠全天候監(jiān)測和控制原料、中間體和最終液體以及高固體顆粒工藝流程。該裝置具有 EHEDG 認(rèn)證,能夠在高達(dá)145°C 的溫度下進(jìn)行清潔和滅菌,是控制酵母擴(kuò)培的理想裝置。
全量程型號的精度為 ±0.1°Brix
免維護(hù),EHEDG 認(rèn)證
標(biāo)準(zhǔn)和客戶特定的濃度公式
可選HMI、各種模擬/數(shù)字和現(xiàn)場總線接口
USB 通過免費(fèi) Pico 3000 軟件配置
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