層析法是根據(jù)物質(zhì)的理化性質(zhì)不同而建立的分離分析方法。根據(jù)層析峰的位置及峰高或峰面積,可以定性及定量。層析法與光學、電學或電化學儀器連用,可檢測出層析后各組份的濃度或質(zhì)量,同時繪出層析圖。層析儀與電子計算機聯(lián)用,可使操作及數(shù)據(jù)處理自動化,大大縮短分析時間。由于層析法具有分辨率高、靈敏度高、選擇性好、速度快等特點,因此適用于雜質(zhì)多、含量少的復雜樣品分析,尤其適用于生物樣品的分離分析。近年來,已成為生物化學及分子生物學常用的分析方法。在醫(yī)藥衛(wèi)生、環(huán)境化學、高分子材料、石油化工等方面也得到了廣泛的應用。
層析法是目前廣泛應用的一種分離技術(shù)。本世紀初植物學家M.Tswett發(fā)現(xiàn)并使用這一技術(shù)證明了植物的葉子中不僅有葉綠素還含有其它色素。現(xiàn)在層析法已成為生物化學、分子生物學及其它學科領(lǐng)域有效的分離分析工具之一。
層析法是利用不同物質(zhì)理化性質(zhì)的差異而建立起來的技術(shù)。所有的層析系統(tǒng)都由兩個相組成:一是固定相,它或者是固體物質(zhì)或者是固定于固體物質(zhì)上的成分;另一是流動相,即可以流動的物質(zhì),如水和各種溶媒。當待分離的混合物隨溶媒(流動相)通過固定相時,由于各組份的理化性質(zhì)存在差異,與兩相發(fā)生相互作用(吸附、溶解、結(jié)合等)的能力不同,在兩相中的分配(含量對比)不同,而且隨溶媒向前移動,各組份不斷地在兩相中進行再分配。與固定相相互作用力越弱的組份,隨流動相移動時受到的阻滯作用小,向前移動的速度快。反之,與固定相相互作用越強的組份,向前移動速度越慢。分部收集流出液,可得到樣品中所含的各單一組份,從而達到將各組份分離的目的。
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