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Kromasil液相色譜柱155|大青葉配方顆粒特征圖譜的測定 高效液相色譜法

來源:上海鯤霆生物科技有限公司   2025年02月19日 16:48  

案例說明

大青葉配方顆粒試樣經水超聲提取后,采用梯度洗脫,用紫外檢測器檢測。大青葉配方顆粒應呈現(xiàn)11個特征峰。

 

分析條件

色譜柱:Kromasil 100-5-C18(w)4.6x250mm (訂貨號:M05WLA25

流動相:(A)甲醇        B0.1%磷酸溶液

按下表進行梯度洗脫:

時間/min

流動相A%

流動相B%

0

0

100

20

3

97

40

20

80

80

45

55

100

70

30

 

流速:1.0mL/min

進樣量:10μL

柱溫:30

波長:260nm

 

分析圖譜

依據(jù)上述色譜條件,分別將參照物溶液與供試品溶液注入液相色譜儀進行測定,

參照物溶液的色譜圖如圖1和圖2所示,色譜圖積分結果見表1。




1參照物溶液色譜圖積分結果

目標物

保留時間

峰面積

峰高

理論塔板數(shù)

分離度

對稱/拖尾因子

尿苷

13.683

1325.626

88.005

20010

-

1.04

腺苷

17.983

1978.065

77.867

14068

8.66

1.57

鳥苷

24.833

1589.416

71.842

30912

11.70

1.09

紫丁香苷

51.983

1822.787

109.000

226580

-

0.96

由表1中數(shù)據(jù)可知,紫丁香苷峰的理論塔板數(shù)為226580,滿足《大青葉配方顆?!分幸?guī)定的不低于5000的要求。

供試品溶液的色譜圖如圖3所示,色譜圖積分結果見表2,特征峰相對保留時間結果見表3

KTYY-LC-155-大青葉配方顆粒特征圖譜的測定-圖3供試品.png


2 供試品溶液色譜圖積分結果

目標物

保留時間

峰面積

峰高

理論塔板數(shù)

分離度

對稱/拖尾因子

1:尿苷

13.758

3140.146

203.821

19981

-

0.98

2:腺苷

18.108

938.206

40.028

14160

8.72

1.48

3:鳥苷

24.933

1452.136

56.695

26634

11.19

1.39

4

31.950

662.504

35.505

64873

12.61

1.22

5

38.242

625.214

33.416

166222

14.35

1.57

6S:紫丁香苷

52.033

720.704

41.351

242837

34.59

1.18

7

56.233

235.898

12.782

209504

9.19

1.03

8

66.383

621.233

30.348

236654

19.58

0.88

9:異葒草苷

69.067

486.083

20.501

305205

5.13

1.78

10:異牡荊苷

78.400

1677.888

91.957

417521

18.95

1.00

11:異金雀花素

80.108

615.450

32.211

407043

3.46

0.97

 

3 特征峰相對保留時間結果表

目標物

保留時間

相對保留時間測定值

相對保留時間規(guī)定值

偏差

4

31.950

0.614

0.567

8.30

5

38.242

0.735

0.686

7.14

6S:紫丁香苷

52.033

-

-

-

7

56.233

1.081

1.159

-6.75

8

66.383

1.276

1.308

-2.46

9:異葒草苷

69.067

1.327

1.352

-1.82

10:異牡荊苷

78.400

1.507

1.465

2.85

11:異金雀花素

80.108

1.540

1.511

1.89

 

由表2和表3中數(shù)據(jù)可知,大青葉配方顆粒供試品溶液的特征峰個數(shù)為11個,與《大青葉配方顆?!分幸?guī)定的特征峰個數(shù)一致;峰1-3,峰6的保留時間與參照物溶液的保留時間相對應,峰4、峰5、峰7、峰8、峰9、峰10和峰11與紫丁香苷(S峰)的相對保留時間分別為0.614、0.7351.081、1.276、1.327、1.507 1.540,均在規(guī)定值的±10%范圍之內。


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