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恒遠(yuǎn)生物|小鼠T淋巴細(xì)胞 CTLL-2 培養(yǎng)攻略
一、細(xì)胞基本信息
品牌名稱: 恒遠(yuǎn)生物
產(chǎn)品貨號(hào): HYCC20033
細(xì)胞名稱：CTLL-2
中文名稱：小鼠T淋巴細(xì)胞
種屬來源：小鼠
組織來源：T細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣
生長特性：懸浮生長
二、培養(yǎng)條件
氣相：95%空氣，5%二氧化碳
溫度：37℃
三、培養(yǎng)基與添加物
基礎(chǔ)培養(yǎng)基：RPMI-1640
添加物：10%特級(jí)胎牛血清（FBS）、100U/ml（或100IU/ml）IL-2、1%青霉素/鏈霉素（P/S）
注意，有些培養(yǎng)體系可能略有不同，但核心成分通常包括RPMI-1640、FBS和IL-2。
四、細(xì)胞培養(yǎng)步驟
1. 細(xì)胞復(fù)蘇
從液氮罐或-80℃冰箱中取出凍存管，迅速放入37℃水浴中搖晃解凍。
將解凍后的細(xì)胞懸液移至含5ml培養(yǎng)基的離心管中，1000rpm離心5min。
棄去上清液，補(bǔ)加5mL培養(yǎng)基后吹勻，接種于T25培養(yǎng)瓶中（或6cm皿中），培養(yǎng)過夜。
第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2. 細(xì)胞傳代
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時(shí)，進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
離心收集細(xì)胞（1000rpm，5-8min），棄去上清液。
補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6mL培養(yǎng)基的T25培養(yǎng)瓶中或6cm培養(yǎng)皿中。
對(duì)于較難培養(yǎng)的細(xì)胞或新手，可采用豎瓶培養(yǎng)法，逐步補(bǔ)加培養(yǎng)基，待細(xì)胞密度升高后再進(jìn)行傳代。
3. 細(xì)胞凍存
選擇生長狀態(tài)良好的細(xì)胞進(jìn)行凍存。
離心收集細(xì)胞（1000rpm，5-8min），去除上清液。
按凍存數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，輕輕混勻后，分裝入凍存管中（每管約1mL細(xì)胞懸液）。
將凍存管放入-80℃冰箱中過夜，然后轉(zhuǎn)入液氮罐中儲(chǔ)存。
五、培養(yǎng)注意事項(xiàng)
細(xì)胞接收與檢查：收到細(xì)胞后，首先檢查細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有異常，請及時(shí)與我司（恒遠(yuǎn)生物）聯(lián)系。
無菌操作：在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程，避免細(xì)胞污染。
細(xì)胞密度監(jiān)控：定期觀察細(xì)胞生長情況，及時(shí)傳代以避免細(xì)胞密度過高導(dǎo)致死亡。
培養(yǎng)基更換：根據(jù)細(xì)胞生長情況和培養(yǎng)基顏色變化，適時(shí)更換新鮮培養(yǎng)基。
六、售后服務(wù)與細(xì)胞保存
若細(xì)胞在運(yùn)輸或培養(yǎng)過程中出現(xiàn)問題，應(yīng)及時(shí)與我司聯(lián)系并提供相關(guān)證據(jù)（如細(xì)胞照片、操作記錄等），以便進(jìn)行售后處理。細(xì)胞應(yīng)儲(chǔ)存在液氮罐中，避免反復(fù)凍融以確保細(xì)胞活性。
上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司擁有自己的實(shí)驗(yàn)室，備有專業(yè)的技術(shù)研發(fā)團(tuán)隊(duì)，長期致力于各種生物試劑，細(xì)胞，血清，ELISA試劑盒的研發(fā)與銷售，實(shí)驗(yàn)提供免費(fèi)代測服務(wù)，并提供技術(shù)服務(wù)，如果您有實(shí)驗(yàn)上的問題歡迎前來咨詢，為您提供專業(yè)的一對(duì)一技術(shù)指導(dǎo)。
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