做好這些，讓基質(zhì)膠流暢到底

一、收到貨后請檢查

1、泡沫箱內(nèi)是否有干冰；

2、基質(zhì)膠是否呈固態(tài)，膠面是否平整；

3、基質(zhì)膠的顏色是否在正常范圍內(nèi)（不含酚紅為白色/乳白色，含酚紅為：黃色-粉紅色-深紅色，由溫度變化決定）；

4、收到貨后如果不是立刻使用基質(zhì)膠，應(yīng)立即將其放進-20/-80℃冰箱長期保存。

二、操作流程說明

每次使用基質(zhì)膠前，應(yīng)嚴(yán)格按照以下基質(zhì)膠操作流程說明進行解凍操作?。。?/strong>

1、提前在-20℃下預(yù)冷“基質(zhì)膠冰盒(abs7289)“（或者準(zhǔn)備碎冰）和200μL槍頭盒1個小時以上，在傍晚下班前將基質(zhì)膠從-20/-80℃冰箱取出并放入“基質(zhì)膠冰盒“（或?qū)⒒|(zhì)膠埋于鋪滿碎冰的冰盒）中，然后再將整個冰盒一起放入4℃冰箱進行過夜解凍；

2、第二天，解凍完成后可進行基質(zhì)膠使用。將基質(zhì)膠從4℃冰箱取出，立即放入-20℃預(yù)冷的“基質(zhì)膠分裝冰盒”（碎冰盒）中，隨后在超凈操作臺/生物安全柜中進行無菌使用；

3、使用時，取出-20℃預(yù)冷的200μL槍頭，并打開基質(zhì)膠瓶蓋（盡可能保證基質(zhì)膠瓶在基質(zhì)膠解凍冰盒上操作）；

4、使用基質(zhì)膠，立即放回冰盒，置于4℃冰箱短期保存即可，兩周內(nèi)使用完畢。

三、必讀的注意事項

1、實驗人員的手心不要直接地接觸基質(zhì)膠部分；

2、整個使用過程都要在預(yù)冷的基質(zhì)膠分裝冰盒（碎冰盒）上進行，該次實驗用不完的基質(zhì)膠可以放在4℃至多保存兩周；

3、一定不要將基質(zhì)膠直接丟在冰箱中解凍和保存，一定要放在“基質(zhì)膠冰盒“（或?qū)⒒|(zhì)膠埋于鋪滿碎冰的冰盒）中再放入4度冰箱解凍或保存；此外，不要放在冰箱門邊解凍或保存，也不要放在經(jīng)常敞開口取放試劑的冰箱解凍或保存，盡可能放在4度冰箱靠里面/抽屜內(nèi)/出冷風(fēng)口處解凍或保存；

4、由于基質(zhì)膠對溫度敏感，故建議使用非除霜型且溫度穩(wěn)定的冰箱進行融解、保存，請一定不要在帶有自動除霜的冰箱中解凍基質(zhì)膠；

5、如使用碎冰盒過夜解凍，應(yīng)固定好基質(zhì)膠瓶位置，確保過夜碎冰融化后基質(zhì)膠瓶不會傾倒，冰水不會浸沒基質(zhì)膠瓶口；

6、基質(zhì)膠使用過程應(yīng)避免反復(fù)凍融；

7、液體基質(zhì)膠會在8℃以上快速成膠（特別是高濃度基質(zhì)膠）。因此，使用時，接觸到基質(zhì)膠的耗材必須預(yù)冷（如移液管、吸頭、EP管等），并且整個實驗必須在無菌、冰上操作；

8、使用時的基質(zhì)膠在冰上應(yīng)呈現(xiàn)液態(tài)，若在冰上使用時基質(zhì)膠已經(jīng)凝固，說明分裝操作未能保持低溫，導(dǎo)致基質(zhì)膠已經(jīng)成膠，不宜再使用；

9、如果發(fā)現(xiàn)放置在4度冰箱中基質(zhì)膠很粘稠，但還是液態(tài)，可以將其放入一個-20℃預(yù)冷的冰盒中，放入-20℃冰箱靜置3-5min，流動性一般都會恢復(fù)正常；如果不能恢復(fù)，則可能為冰箱溫度太高導(dǎo)致凝膠，建議不要使用。

四、Q&A

Q1：為什么我的基質(zhì)膠很粘稠？

A1：基質(zhì)膠的蛋白濃度越高，膠體越粘稠。如果濃度高于13.0mg/mL，基質(zhì)膠會顯得非常濃稠。基質(zhì)膠產(chǎn)品在未稀釋前都會比較粘稠。粘稠的高濃度基質(zhì)膠不稀釋也可以直接使用，如用于培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞和/或血管生成因子，注射于小鼠體內(nèi)后，細(xì)胞可以保持原位，便于原位分析和/或以后的切除；或者稀釋后，按照標(biāo)準(zhǔn)濃度的基質(zhì)膠產(chǎn)品使用方法使用，具體稀釋濃度根據(jù)實驗需求確定。

A2：除因為產(chǎn)品本身濃度高而粘稠外，基質(zhì)膠的狀態(tài)還與運輸過程中溫度的變化和儲藏條件有關(guān)。整個運輸過程中必須使用干冰運輸。如果儲藏基質(zhì)膠的冰箱帶有自動除霜功能，冰箱除霜過程中升溫，可能使基質(zhì)膠成膠。所以，切忌將基質(zhì)膠儲藏于此類帶有自動除霜的冰箱中。為保證基質(zhì)膠的使用效果，凍融次數(shù)應(yīng)該盡可能減少。特別注意：水的溫度傳遞、冰的溫度傳遞、冰水的溫度傳遞和空氣的溫度傳遞不同，空氣溫度傳遞特別慢和溫度分布不均一，因此基質(zhì)膠解凍不能直接丟在2-8度冰箱解凍，一定要放在冰盒/冰水混合物中，再放入0-4℃的冰箱解凍。

今天講解就到這了，大家如有實驗問題，歡迎一起交流哦！

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