在分子生物學研究中,精準檢測大腸桿菌(E.coli)殘留RNA時,樣本中混雜的DNA可能干擾實驗結果。針對這一需求,由柏萊源(天津)生物科技有限公司代理的譜新生物Hillgene推出的E.coli殘留總RNA樣本前處理試劑盒(Cat. No. HG-CL300),通過高效去除DNA污染,為后續(xù)RNA檢測提供純凈樣本。本文將詳細介紹其原理、操作步驟及核心優(yōu)勢,助力科研人員提升實驗效率。
一、產(chǎn)品簡介:為何需要去除E.coli殘留DNA?
在基因表達分析、RNA測序或病原體檢測等實驗中,殘留的宿主DNA可能導致假陽性結果或數(shù)據(jù)偏差。本試劑盒專為去除E.coli樣本中的DNA污染設計,通過DNase I酶切技術,結合RNase Inhibitor保護RNA完整性,確保檢測結果高度可靠。
適用場景:配套E.coli殘留總RNA檢測試劑盒(HG-ER001),適用于藥物研發(fā)、細胞治療產(chǎn)品質控等科研領域。
核心優(yōu)勢:
高效去DNA:DNase I快速消化DNA,37℃孵育60分鐘即可完成。
RNA保護:添加RNase Inhibitor,防止RNA降解。
操作簡便:預混反應體系,20分鐘完成滅活與保存。
二、試劑盒組成與儲存條件
每盒包含100次反應所需組分(詳見表1):
組分 | 體積 | 存儲條件 |
---|---|---|
10X Reaction Buffer | 220μL | -20℃ |
DNase I | 110μL | -20℃ |
RNase Inhibitor | 55μL | -20℃ |
無酶水 | 2×1mL | -20℃ |
有效期:-20℃保存可達18個月,避免反復凍融。
三、實驗步驟詳解(附操作流程圖)
1. 反應體系配置
按表2配制20μL反應液:
組分 | 用量(μL) |
---|---|
DNase I | 1 |
10X Reaction Buffer with MgCl2 | 2 |
RNase Inhibitor | 0.5 |
無酶去離子水 | 12.5 |
供試品 | 4 |
2. 酶切與滅活流程
步驟1:混勻反應液,離心后37℃孵育60分鐘。
步驟2:65℃加熱10分鐘滅活DNase I,2-8℃暫存樣本。
四、關鍵注意事項
分區(qū)操作:陽性與陰性樣本需在不同區(qū)域處理,避免交叉污染。
低溫操作:試劑融化后置于冰上使用,確保酶活性。
耗材更換:每一步驟更換吸頭,減少氣溶膠污染風險。
配套使用:建議搭配原廠檢測試劑盒(HG-ER001)以保證最佳效果。
五、常見問題解答(FAQ)
Q1:能否用于臨床診斷?
本試劑盒僅限科研用途,不適用于臨床檢測。
Q2:DNase I滅活不徹i底怎么辦?
嚴格按65℃加熱10分鐘操作,瞬時離心確保徹i底滅活。
Q3:樣本處理后的保存時間?
滅活后樣本建議2-8℃保存不超過24小時,避免RNA降解。
六、為何選擇Hillgene?
高穩(wěn)定性:通過凍融循環(huán)驗證,無需分裝。
專業(yè)支持:提供技術咨詢與定制化解決方案。
嚴控質控:每批次試劑均經(jīng)過嚴格質檢,確保實驗可重復性。
七、結語
E.coli殘留總RNA樣本前處理試劑盒(HG-CL300)憑借其高效去DNA能力與操作便捷性,已成為分子生物學研究的優(yōu)選工具。無論是基因治療產(chǎn)品開發(fā),還是病原體RNA檢測,均能顯著提升實驗精準度。立即聯(lián)系柏萊源生物獲取更多產(chǎn)品信息!
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柏萊源(天津)生物科技有限公司的優(yōu)勢:
現(xiàn)貨供應:公司庫存充足,可快速發(fā)貨,減少用戶等待時間。
效期保障:嚴格把控產(chǎn)品質量,確保試劑效期新鮮,保障實驗結果的可靠性。
專業(yè)技術支持:提供詳細的實驗方案和技術指導,幫助用戶優(yōu)化實驗條件,提高實驗成功率。
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