【科研人必看】如何找到適合你實(shí)驗(yàn)的抗體

做Western Blot雜帶多？免疫熒光背景像星空？ELISA檢測總翻車？

別急著懷疑自己的手！可能是你的抗體沒選對！

今天手把手教你避坑，輕松get靠譜抗體選擇技巧！

?【選抗體必看3步法】

??Step 1：明確靶標(biāo)

?? 了解待測靶標(biāo)：在uniprot查詢待測蛋白信息，包括名稱、分子量、陽性組織/細(xì)胞種類、亞細(xì)胞定位等。

??實(shí)驗(yàn)應(yīng)用目的：研究靶蛋白細(xì)胞定位可選IHC/IF；研究靶蛋白是表達(dá)或定量可選WB，ELISA。

??實(shí)驗(yàn)樣本：明確實(shí)驗(yàn)樣本，選擇合適的陽性對照。

??Step 2：了解抗體信息

?? 抗體名稱（Antibody name）: 含靶蛋白名稱，磷酸化抗體含磷酸化位點(diǎn)；

??抗體貨號（Catalog number）: 抗體獨(dú)*無*標(biāo)記，相同貨號抗體也會有不同批次號，如需重復(fù)實(shí)驗(yàn)的，選同一批號抗體。

??宿主（Host）: 抗體來源物種，常見有Rabbit, Mouse, Human,等，避免選擇與樣本物種相同來源的抗體，防止同源高背景。

??克隆類型（Clonality）: 多克?。≒olyclonal）多抗原表位，親和性高，有利信號放大，適用表達(dá)水平低和抗原微小修飾的檢測；單克隆(Monoclonal)單一抗原表位，特異性高，批次一致性高，適用要求高特異性和重復(fù)實(shí)驗(yàn)的研發(fā)。

??檢測應(yīng)用 （Tested applications）: 抗體檢測過的實(shí)驗(yàn)類型比如WB, IHC，ELISA等，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇。

??反應(yīng)物種（Reactivity）: 抗體檢測過的物種，確保里面包含待測樣本的物種。

??免疫原（Immunogen）: 包含多肽和重組蛋白，多肽片段短，獲得的抗體特異性一般沒有重組蛋白作為免疫原的高，比較抗體免疫原的Uniprot ID信息，是否是你要測的目的蛋白。

??抗體檢測結(jié)果圖：非常重要，根據(jù)抗體檢測結(jié)果可以分辨抗體的特異性和物種適應(yīng)性，有些抗體還提供敲除/敲低樣本驗(yàn)證圖，多物種交叉反應(yīng)數(shù)據(jù)的更優(yōu)。

??其他考慮因素：抗體價格或貨期，售后服務(wù)有保障。

??Step 3：小樣測試

??購買小規(guī)格進(jìn)行小樣測試；

??建議先跑陽性對照，摸索**抗體稀釋比例。