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可見分光光度計是一種常用的分析儀器，用于測量樣品在可見光區(qū)的吸光度。為了保證其測量的準確性和可靠性，定期校準是至關(guān)重要的。以下是對可見分光光度計校準過程的詳細描述：
一、校準前的準備
1. 環(huán)境條件檢查
- 需確保校準環(huán)境穩(wěn)定。溫度應(yīng)控制在儀器規(guī)定的范圍內(nèi)，通常為 15℃ - 35℃，避免溫度波動過大影響儀器性能。濕度一般要求在 40% - 80%，防止高濕度導(dǎo)致電子元件受潮或出現(xiàn)凝露現(xiàn)象。同時，要將儀器放置在平穩(wěn)的工作臺上，避免振動干擾。
2. 儀器外觀與清潔檢查
- 仔細檢查儀器外觀，查看是否有損壞、劃痕或松動的部件。特別要注意比色皿架、波長調(diào)節(jié)旋鈕等部位的完整性。
- 對儀器進行清潔，用干凈的軟布擦拭外殼，去除灰塵和污漬。對于光學(xué)部件，如光源燈罩、比色皿架等，要用專門的光學(xué)清潔工具輕輕擦拭，防止劃傷光學(xué)表面。
二、波長準確性校準
1. 選擇合適的標準物質(zhì)
- 常用的標準物質(zhì)有鈥濾光片、鐠釹濾光片等。這些濾光片具有特定的吸收波長，可用于準確校準儀器波長。例如，鈥濾光片在 279.0nm、287.0nm 等波長處有特征吸收峰。
2. 校準操作步驟
- 將標準物質(zhì)(如鈥濾光片)正確安裝在比色皿架上，注意安裝方向要正確，確保濾光片表面與光路垂直。打開儀器電源，讓儀器預(yù)熱一段時間，一般為 15 - 30 分鐘，使儀器達到穩(wěn)定的工作狀態(tài)。
- 通過儀器的操作界面設(shè)置掃描波長范圍，使其包含標準物質(zhì)的特征吸收波長。然后啟動掃描程序，儀器開始測量標準物質(zhì)在不同波長下的吸光度。
- 掃描完成后，觀察測量得到的吸光度峰值對應(yīng)的波長是否與標準物質(zhì)的特征波長相符。如果有偏差，按照儀器的操作手冊進行調(diào)整。調(diào)整方法可能因儀器型號而異，一般是通過調(diào)節(jié)波長調(diào)節(jié)旋鈕或在軟件界面輸入校準系數(shù)來進行。
三、吸光度準確性校準
1. 使用標準溶液
- 采用已知濃度和吸光度的標準溶液，如一定濃度的重鉻酸鉀溶液。將標準溶液倒入比色皿中，約 3/4 高度即可。用擦鏡紙擦拭比色皿外壁，避免指紋和污漬影響測量。
2. 吸光度測量與校準
- 將裝有標準溶液的比色皿放入比色皿架，正確定位。在儀器操作界面上設(shè)置測量波長，該波長應(yīng)是標準溶液有明確吸光度值的波長。
- 進行吸光度測量，讀取測量值并與標準溶液的理論吸光度值進行比較。如果存在差異，通過儀器的校準功能進行調(diào)整。調(diào)整方法可能是對滿度吸光度進行重新設(shè)定，或者根據(jù)儀器提示輸入校準因子。
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