在體內,基底膜是以細胞為基礎的薄層細胞外基質?;|膠是一種可溶性的基底膜制劑,這種基質是從Engelbreth-HolmSwarm(EHS)小鼠肉瘤,一種富含細胞外基質蛋白的腫瘤中抽提出來的。它的主要成分是層粘連蛋白,接著是膠原蛋白Ⅳ、硫酸乙酰肝素蛋白多糖和巢蛋白?;|膠也含有轉化生長因子β、 表皮生長因子、類胰島素生長因子、成纖維細胞生長因子、組織纖溶酶原激活物和在EHS腫瘤中自然出現的其他生長因子?;|膠對正常和變換的錨定依賴型上皮樣細胞和其他細胞類型的附著和分化是有效的。這些細胞類型包括神經元肝細胞支持細胞小雞晶狀體上皮細胞和血管內皮細 胞。在成年大鼠肝細胞血管內皮細胞以及小鼠和人乳腺上皮細胞的三維細胞培養(yǎng)中,基質膠會影響基因 的表達。這是幾種類型腫瘤細胞侵襲實驗的基礎,支持體內末梢神經再生,并提供體外和體內血管再生研究的必需底物?;|膠也支持免疫抑制小鼠中體內人類腫瘤的增殖?;|膠能用于未分選乳腺細胞的移植以及分選的上皮細胞亞群嵌入基質膠。這一基質也被作為癌癥干細胞模型并被證明能在體內增強腫瘤生長速率。
基質膠的主要成分:
1. 層粘連蛋白(Laminin):這是基質膠中含量最高的成分,是一種主要的基底膜糖蛋白,具有促進細胞黏附、遷移和分化的功能。
2. IV型膠原(Collagen IV):這是另一種主要的結構蛋白,有助于形成基底膜的支架。
3. 巢蛋白(Nidogen/Entactin):這是一種連接蛋白,能夠將層粘連蛋白和IV型膠原連接起來,增強基底膜的穩(wěn)定性。
4. 硫酸肝素蛋白多糖(Heparan Sulfate Proteoglycans, HSPGs):如Perlecan,具有結合生長因子和調節(jié)細胞行為的功能。
5. 生長因子:基質膠中含有多種生長因子,如表皮生長因子(EGF)、轉化生長因子β(TGF-β)、胰島素樣生長因子(IGF)和成纖維細胞生長因子(FGF)等,這些因子能夠影響細胞的生長、分化和血管生成。
6. 其他成分:還包括一些其他ECM蛋白、酶和生長因子結合蛋白等。
基質膠種類
主要有常規(guī)標準型(Standard)、高濃度(HC)、無酚紅(Phenol red-free)、生長因子減量型(Growth factor reduced, GFR)和人胚胎干細胞專用(hESC-qualified)幾個類別。
? 標準型基質膠:濃度范圍大致為 8-12mg/ml
? 高濃度基質膠:濃度范圍大致為 18-22mg/ml
? 無酚紅基質膠:不含酚紅,產品融化后顏色透明
? 生長因子減量型基質膠:基質膠里包含的生長因子經過減量處理
? 人胚胎干細胞專用基質膠:經過對 hESC 培養(yǎng)的測試,可以用于人胚胎干細胞的培養(yǎng)
基質膠的主要用途:
1.細胞培養(yǎng):作為三維(3D)細胞培養(yǎng)的支架,模擬體內細胞外基質環(huán)境,促進細胞的生長、分化和形態(tài)發(fā)生。
2.血管生成研究:用于體外或體內血管生成實驗,評估血管生成抑制劑或促進劑的效果。
3.腫瘤研究:用于研究腫瘤細胞的侵襲、轉移和血管生成。
4.干細胞研究:用于干細胞的培養(yǎng)和分化,模擬干細胞微環(huán)境。
使用注意事項:
1.溫度敏感性:基質膠在4°C時呈液態(tài),在室溫或37°C時會迅速凝結成凝膠狀。因此,在操作過程中需要保持低溫。
2.無菌操作:為了避免污染,所有操作需要在無菌條件下進行。
3.生長因子含量:基質膠中含有多種生長因子,可能會影響實驗結果,因此需要根據實驗目的選擇合適的基質膠類型。
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