透明質(zhì)酸鈉測定

透明質(zhì)酸鈉測定

透明質(zhì)酸鈉(hyaluronicacid，簡稱ha)又名玻尿酸，是人體組織中保持水分最重要的物質(zhì)，透明質(zhì)酸是皮膚固有的天然生物分子,分子量較小的透明質(zhì)酸可滲入皮膚表皮層,促進(jìn)營養(yǎng)的供給和廢物的排泄,從而防止皮膚老化,起到美容和養(yǎng)顏的作用。

 本次根據(jù)透明質(zhì)酸鈉飲品測定標(biāo)準(zhǔn)T/CNFIA155-2022 ,為一種含透明質(zhì)酸鈉的固體飲料及其中透明質(zhì)酸鈉含量檢測方法。

一、樣品制備

1.樣品前處理

 取樣品適量(相當(dāng)于透明質(zhì)酸鈉10mg),置于燒杯中,加入3mL~5mL磷酸鹽緩沖液，混勻。用0.1 mol/L 氫氧化鈉溶液或0.1mol/L鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至6.0后,用磷酸鹽緩沖液轉(zhuǎn)移并定容至10 mL容量瓶中，混勻。

2.酶解

 準(zhǔn)確移取 0.50 mL上述處理后的樣品溶液至10mL離心管中,補(bǔ)加磷酸鹽緩沖液至5mL,再加入1 mL透明質(zhì)酸酶溶液,混勻,42℃水浴中酶解2h。沸水浴2min,終止反應(yīng)。冷卻至室溫后,將上述酶解液轉(zhuǎn)移至10mL容量瓶中,用磷酸鹽緩沖液定容并搖勻。經(jīng)0.22μm水相濾膜過濾后供高效液相色譜測定。

二、色譜柱選擇

色譜柱：Morphling Sugar-H   7.8*300mm   8μm

檢測波長：232nm

柱溫：40℃

流動相：1%磷酸水溶液

流速：0.6ml/min

進(jìn)樣量：20μl

三、色譜圖