從原理到實操，蝦青素抗肝纖維化實驗流程?。?）

3 C57小鼠肝纖維化模型每周監(jiān)測
在肝纖維化模型建立過程中，每周系統監(jiān)測小鼠的體重、活動度及毛發(fā)狀態(tài)是評估模型進展、藥物干預效果及動物福利的關鍵環(huán)節(jié)。以下為具體操作流程及注意事項：

3.1 監(jiān)測頻率與時間點

• 監(jiān)測頻率：每周固定時間點（如每周一上午9:00-11:00）監(jiān)測1次。

• 監(jiān)測周期：

模型誘導期：DMN注射開始至建模完成（通常4-6周）。  

干預治療期：給藥開始至實驗終點（通常4-8周）。  

3.2 具體監(jiān)測方法與記錄標準

3.2.1 體重稱量

操作步驟：

1. 設備準備：使用精度0.1 g的電子天平，校準歸零。

2. 小鼠固定：

• 輕柔抓取小鼠尾部，將其置于專用稱量盒（底部鋪濾紙防滑）。  

• 避免抓握腹部（可能加劇肝區(qū)疼痛）。  

3. 稱量記錄：待數值穩(wěn)定后記錄體重（單位：g），精確至小數點后1位。

4. 清潔消毒：每次稱量后用75%酒精擦拭稱量盒，防止交叉污染。  

5. 計算體重變化率} (%) = {本周體重} - {上周體重}}/{上周體重}} * 100%

6. 異常判定：

• 顯著下降：連續(xù)2周體重降幅≥10%，或單周降幅≥15%。

• 顯著上升：排除腹水后，體重增幅≥20%（可能提示代謝異常）。  

3.2.2 活動度評估

觀察指標：

• 自主活動：在開放場（如30 cm×30 cm透明箱）中觀察5分鐘，記錄以下行為：

• 水平運動：穿越區(qū)域次數（四肢全部進入新區(qū)域計1次）。  

• 垂直探索：前肢離地站立次數（持續(xù)≥1秒）。  

• 靜止時間：無主動移動的累計時間（秒）。  

• 應激反應：抓取時掙扎強度（輕度/中度/劇烈）。

評分標準（參考改良的Murphy評分）：

記錄與處理：

評分≥2分且持續(xù)48小時，需考慮提前優(yōu)逝。

3.2.3 毛發(fā)狀態(tài)觀察

觀察指標：

• 毛發(fā)蓬松度：正常（緊貼皮膚） vs. 蓬松（豎立如“炸毛”）。

• 光澤度：光滑有光澤 vs. 暗淡無光。

• 脫毛區(qū)域：記錄脫毛部位（頭頸部、背部、腹部）及面積（直徑cm）。

• 皮膚損傷：紅斑、結痂、潰瘍等。

分級記錄：

• 1級異常：加強墊料清潔，補充維生素（如飲水中添加復合維生素B）。

• 2級異常：結合體重和活動度評估，必要時終止實驗。

3.3 注意事項

1. 減少應激：

• 固定監(jiān)測人員，操作輕柔，避免噪音干擾。  

• 稱重與行為學觀察在不同時間段進行（如上午稱重，下午行為測試）。  

2. 環(huán)境控制：

維持SPF級環(huán)境（溫度22-24℃，濕度50-60%），避免環(huán)境波動影響數據。  

3. 倫理閾值：

體重下降≥20%、活動度評分≥2持續(xù)48小時或嚴重皮膚損傷，需立即啟動優(yōu)逝程序。  

3.4 常見問題與解決方案

通過系統監(jiān)測體重、活動度及毛發(fā)狀態(tài)，可全面評估肝纖維化模型小鼠的生理狀態(tài)，為實驗結果的可靠性及倫理合規(guī)性提供保障。

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