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蛋白胨(Peptone)用戶指南

來源:上海易匯生物科技有限公司   2025年04月17日 19:01  

蛋白胨(Peptone)用戶指南

——微生物培養(yǎng)基核心成分的專業(yè)解析

一、產品概述

蛋白胨(Peptone)是一種由動物組織(如牛肉、酪蛋白)或植物蛋白(如大豆)經(jīng)酶解或酸水解制備的氮源物質,廣泛用于微生物培養(yǎng)基的配制。其核心功能包括:

  • 提供氮源:為微生物生長提供氨基酸、多肽及小分子肽類。

  • 促進生長:含維生素、礦物質等微量成分,加速菌體代謝。

  • 增強適應性:不同來源的蛋白胨可優(yōu)化特定菌株的生長環(huán)境。

二、分類與特性


類型原料來源適用場景特點
動物源蛋白胨牛肉、豬骨細菌、真菌培養(yǎng)(如大腸桿菌、酵母)氨基酸組成豐富,含維生素B族
植物源蛋白胨大豆、小麥乳酸菌、植物內生菌培養(yǎng)低過敏原性,適合植物共生菌研究
酪蛋白胨牛奶酪蛋白分子生物學實驗(如質粒轉化)純度高,批次間穩(wěn)定性強
胰蛋白胨動物胰酶水解高要求微生物(如支原體、衣原體)富含支鏈氨基酸,促進細胞膜合成


三、技術參數(shù)


指標標準值檢測方法
總氮含量≥12.0%凱氏定氮法
氨基酸含量≥8.0%高效液相色譜法(HPLC)
灰分≤5.0%灼燒法
pH值(1%水溶液)6.5-7.5電位滴定法
溶解性全溶,無沉淀目視觀察


四、操作指南

  1. 培養(yǎng)基配制

    • 按配方比例稱取蛋白胨(如LB培養(yǎng)基:10 g/L蛋白胨),加入蒸餾水攪拌溶解。

    • 調節(jié)pH至目標值(如7.0±0.2),121℃高壓滅菌20分鐘。

  2. 無菌操作

    • 滅菌后培養(yǎng)基需在超凈臺內分裝,避免二次污染。

    • 固體培養(yǎng)基冷卻至50-55℃時倒平板,防止冷凝水過多。

  3. 儲存條件

    • 未開封的蛋白胨需密封保存于干燥陰涼處,避免吸潮結塊。

    • 開封后建議分裝,4℃冷藏保存,有效期6個月。

五、應用場景

  • 微生物發(fā)酵:作為氮源用于抗生素(如青霉素)、氨基酸(如谷氨酸)的生產。

  • 分子生物學:在LB、SOB等培養(yǎng)基中促進質粒擴增和轉化效率。

  • 食品微生物檢測:用于沙門氏菌、金黃色葡萄球菌的分離培養(yǎng)。

  • 環(huán)境科學:研究土壤微生物群落對不同氮源的響應。

六、質量驗證

  1. 微生物生長測試

    • 在LB培養(yǎng)基中接種大腸桿菌(E. coli),37℃培養(yǎng)12小時后,菌落直徑應≥2 mm。

  2. 氨基酸譜分析

    • 使用HPLC檢測,必需氨基酸(如亮氨酸、異亮氨酸)占比≥30%。

  3. 無菌驗證

    • 按《中國藥典》2020版要求,37℃培養(yǎng)7天,無菌生長。

七、注意事項

  1. 原料溯源

    • 動物源蛋白胨需確認原料無瘋牛病(BSE)風險,植物源需避免轉基因成分。

  2. 批次一致性

    • 長期實驗建議使用同一供應商的同一批次產品,減少實驗誤差。

  3. 替代方案

    • 對高成本實驗,可嘗試酵母提取物(Yeast Extract)部分替代蛋白胨(比例1:1)。

八、常見問題解答

  • Q:蛋白胨結塊是否影響使用?
    A:輕微結塊可微波低火加熱溶解,嚴重結塊需更換新批次。

  • Q:如何降低培養(yǎng)基泡沫?
    A:減少蛋白胨用量至8 g/L,或添加0.1%消泡劑(如聚二甲基硅氧烷)。

  • Q:蛋白胨與水解酪蛋白(Casein Hydrolysate)的區(qū)別?
    A:蛋白胨為多肽混合物,水解酪蛋白為更小分子肽,適合不同菌株需求。

九、供應商信息

  • 推薦品牌:Oxoid、BD Difco、青島海博生物

  • 檢測標準:符合USP、EP、CP藥典要求

  • 技術支持:提供氨基酸譜分析報告及微生物生長驗證數(shù)據(jù)



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