賽爾瑞成TOPO克隆試劑盒、無縫克隆和Gateway系統(tǒng)

一、TOPO克隆試劑盒

產(chǎn)品介紹
本制品和傳統(tǒng)的T4連接酶原理不同，它利用了Topoisomerase可以在瞬間（幾秒鐘-幾分鐘）、高效（接近100%）連接DNA片段的原理采用本公司工藝制成。

產(chǎn)品特點
1. 可以在瞬間（幾秒鐘-幾分鐘）完成連接。
2. 無需冰浴和熱休克，室溫5分鐘內(nèi)完成轉(zhuǎn)化；無需1小時復(fù)蘇，只需37?C 10分鐘復(fù)蘇便可以涂板。從連接到涂板只需15-20分鐘。
3. 無自連、零背景，無需繁瑣藍白斑篩選，見到長出的克隆便是有插入的（接近100%）。
4. 測序可以采用 M13F/M13R通用引物測序

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二、一步法無縫單/多片段克隆mix

產(chǎn)品介紹
本產(chǎn)品不依賴于T4 DNA連接酶，不受載體和目的片段的酶切位點限制，而直接用重疊片段重組的方法，采用特殊的酶組合可以將任意方法線性化后的載體和與其兩端具有15-25bp重疊區(qū)域的PCR片段定向重組，可以快速實現(xiàn)1-5個片段的高效無縫克隆。本產(chǎn)品采用5x高濃縮形式，使得反應(yīng)體系中能加入更多的目的片段，從而提高連接效率，特別適合一些高難度的連接反應(yīng)。

產(chǎn)品特點
1. 30分鐘可以將一個或者多個長、短PCR擴增片段（平末端或者A粘性末端）插入載體。
2. 不受載體和插入片段酶切位點的可用性和平端/粘性末端的限制，可以在任意位點進行克隆。
3. 無縫克隆，插入點不會引入不需要的堿基序列。
4. 高效、準確，陽性率＞95% 。

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三、Gateway克隆-Gateway LR Clone Kit

產(chǎn)品介紹
Gateway克隆系列產(chǎn)品是一種嶄新的高通量基因克隆技術(shù)，可以簡單高效地把入門載體 (The EntryClone) 克隆到多種目的載體 (Destination vector) 中。Gateway 克隆技術(shù)無需依賴限制性內(nèi)切酶和連接酶的傳統(tǒng)克隆技術(shù)，而是利用天然的 λ 噬菌體與大腸桿菌 (E. coli) 的染色體之間產(chǎn)生的位點 (att)特異性的重組整合，使 DNA 片段在不同的克隆載體之間實現(xiàn)轉(zhuǎn)移。Gateway 克隆重組技術(shù)具有可靠的穩(wěn)定性，當基因在重組目的表達載體之間快速簡便地穿梭時，可以保證基因以正確的方向插入并保持閱讀框架不發(fā)生改變。Gateway LR Clone Kit 可以將所選基因克隆到多種表達目的載體中。此 LR Clone Enzyme 與基因文庫里的各種人、小鼠和大鼠的 ORF 載體相兼容。Gateway 克隆體系在細菌轉(zhuǎn)化這個環(huán)節(jié)使用正向篩選(抗生素)和負向篩選(ccdB 致死基因)兩種篩選，以確保得到高比例的陽性重組。

產(chǎn)品特點
1. 靈活便捷：易于把基因克隆到帶有不同啟動子和標記的多種載體。
2. 方便快速：縮短實驗前計劃時間，無需限制性內(nèi)切酶和連接酶。
3. 準確無誤：基因以正確的方向插入并保持閱讀框架不發(fā)生改變。
4. 無需測序：一旦入門載體 (The Entry Clone) 被建立，就可以使用 Gateway 克隆系統(tǒng)克隆至任意Gateway 目的載體 (Destination vector) ，無需擔心引入突變。

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