Qubit RNA IQ Assay Kit的檢測(cè)原理是什么？

染料與 RNA 特異性結(jié)合：試劑盒中的熒光染料能夠特異性地結(jié)合到 RNA 分子上。這種染料具有特殊的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)，它可以插入到 RNA 的雙鏈區(qū)域或與 RNA 的特定結(jié)構(gòu)域相互作用，而且結(jié)合的程度與 RNA 的量成正比。

熒光信號(hào)產(chǎn)生與檢測(cè)：當(dāng)熒光染料結(jié)合到 RNA 上后，在特定波長(zhǎng)的激發(fā)光照射下，染料會(huì)被激發(fā)并發(fā)出熒光。Qubit 儀器能夠精確地檢測(cè)到這種熒光信號(hào)的強(qiáng)度。由于熒光信號(hào)強(qiáng)度與結(jié)合的染料量成正比，而染料量又與 RNA 的量成正比，所以通過(guò)檢測(cè)熒光信號(hào)強(qiáng)度就可以準(zhǔn)確地測(cè)定 RNA 的濃度。

RNA 質(zhì)量評(píng)估：該試劑盒不僅可以檢測(cè) RNA 濃度，還能評(píng)估 RNA 的質(zhì)量。它是通過(guò)檢測(cè)不同大小 RNA 片段所產(chǎn)生的熒光信號(hào)分布來(lái)實(shí)現(xiàn)的。例如，完整的核糖體 RNA（rRNA）包括 28S rRNA 和 18S rRNA 等，它們的大小不同。在正常情況下，細(xì)胞內(nèi)的 rRNA 含量相對(duì)穩(wěn)定，且 28S rRNA 與 18S rRNA 的比值也較為固定。當(dāng) RNA 發(fā)生降解時(shí)，rRNA 會(huì)斷裂成較小的片段，導(dǎo)致 28S rRNA 與 18S rRNA 的比值發(fā)生變化，以及 RNA 完整性指數(shù)（RIN）改變。Qubit RNA IQ Assay Kit 通過(guò)分析熒光信號(hào)在不同大小片段上的分布情況，計(jì)算出 RIN 值和 28S/18S 比值等參數(shù)，從而評(píng)估 RNA 的質(zhì)量和完整性。