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液相色譜系統(tǒng)是一種重要的分析工具

來源:諳薩(上海)實(shí)業(yè)有限公司   2025年05月21日 15:21  
  液相色譜系統(tǒng)是一種在化學(xué)、生物、醫(yī)藥等諸多領(lǐng)域廣泛應(yīng)用的重要分析工具,它主要由多個(gè)關(guān)鍵部分協(xié)同工作來實(shí)現(xiàn)對(duì)混合物中各成分的分離與分析,其核心原理基于樣品中不同組分在固定相和流動(dòng)相之間的分配差異。當(dāng)流動(dòng)相攜帶樣品通過裝有固定相的色譜柱時(shí),各組分與固定相和流動(dòng)相的作用力不同,導(dǎo)致它們?cè)谥械倪w移速度不同,從而實(shí)現(xiàn)分離。
 
  液相色譜系統(tǒng)各流程之間的校準(zhǔn)方法:
 
  1.流速校準(zhǔn):
 
  -稱重法:在一定的流速設(shè)置下,準(zhǔn)確收集一段時(shí)間內(nèi)流出的流動(dòng)相,通過稱重計(jì)算實(shí)際流速。例如,以甲醇為流動(dòng)相,按設(shè)定流量,待流速穩(wěn)定后,在流動(dòng)相排出口用事先清洗稱重過的容量瓶收集流動(dòng)相,同時(shí)用秒表計(jì)時(shí),準(zhǔn)確地收集10 -25分鐘,稱重后根據(jù)流動(dòng)相的密度計(jì)算實(shí)際流速,與設(shè)定流速進(jìn)行比較,偏差應(yīng)在允許范圍內(nèi)。
 
  -儀器自帶校準(zhǔn)功能:許多現(xiàn)代液相色譜儀具有自帶的流速校準(zhǔn)程序,可按照儀器操作手冊(cè)中的說明進(jìn)行操作,儀器會(huì)自動(dòng)對(duì)流速進(jìn)行校準(zhǔn)和調(diào)整。
 
  2.檢測(cè)器校準(zhǔn):
 
  -波長(zhǎng)校準(zhǔn)(針對(duì)紫外 -可見檢測(cè)器等):使用合適的波長(zhǎng)校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品,如鈥玻璃濾光片等,調(diào)整檢測(cè)器的波長(zhǎng),使其與標(biāo)準(zhǔn)品的特征吸收波長(zhǎng)相符,以確保檢測(cè)器在不同波長(zhǎng)下的準(zhǔn)確性。
 
  -靈敏度校準(zhǔn):使用標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)樣,設(shè)置合理的流速和檢測(cè)器參數(shù),調(diào)整檢測(cè)器增益,逐漸增大信號(hào)幅度,記錄增益值,并與儀器規(guī)格進(jìn)行比較。
 
  3.進(jìn)樣器校準(zhǔn):
 
  -對(duì)于手動(dòng)進(jìn)樣器,可使用微量注射器抽取已知體積的標(biāo)準(zhǔn)溶液,多次進(jìn)樣,根據(jù)進(jìn)樣后色譜峰的響應(yīng)值計(jì)算實(shí)際進(jìn)樣量,與理論進(jìn)樣量進(jìn)行比較,評(píng)估進(jìn)樣器的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。
 
  -對(duì)于自動(dòng)進(jìn)樣器,可通過設(shè)置不同的進(jìn)樣量,連續(xù)多次進(jìn)樣,檢查進(jìn)樣量的準(zhǔn)確度和精密度是否符合要求。同時(shí),檢查進(jìn)樣器的進(jìn)樣順序、交叉污染等情況。
 
  4.保留時(shí)間校準(zhǔn):
 
  -使用含有多種組分的標(biāo)準(zhǔn)品溶液,通過比較標(biāo)準(zhǔn)品中各組分在液相色譜圖上的保留時(shí)間,對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)??稍谙嗤纳V條件下,定期進(jìn)樣標(biāo)準(zhǔn)品溶液,觀察保留時(shí)間的變化情況,若超出允許范圍,則需要進(jìn)行調(diào)整。

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