在細胞培養(yǎng)領(lǐng)域，胰酶類產(chǎn)品常用于細胞解離，但 TrypLE Express 酶與傳統(tǒng)胰酶及其他同類產(chǎn)品相比，在多個關(guān)鍵方面存在顯著差異。
TrypLE Express 酶屬于非動物源性重組酶，它通過受控的發(fā)酵工藝制備，整個生產(chǎn)過程不涉及任何動物來源成分。這一特性使其從源頭上杜絕了潛在致病污染物引入的風(fēng)險，比如動物源可能攜帶的病毒（如豬細小病毒、偽狂犬病毒等，常見于從豬胰腺提取的胰酶中）、朊蛋白等，為細胞培養(yǎng)實驗提供了的生物安全性，特別適合對實驗環(huán)境純凈度和細胞安全性要求嚴苛的研究，如干細胞研究、基因治療相關(guān)細胞制備等。
傳統(tǒng)胰酶大多從動物（如豬、牛）的胰腺組織中提取。這種來源方式使得胰酶產(chǎn)品不可避免地存在動物源污染風(fēng)險，即使經(jīng)過多道純化工藝，仍難以清除潛在的有害病原體，可能對細胞培養(yǎng)造成干擾，影響實驗結(jié)果的準確性和可重復(fù)性，限制了其在一些科研及臨床前研究中的應(yīng)用。
該酶特異性地裂解賴氨酸和精氨酸 C - 末端的肽鍵，作用位點相對單一且明確。這種特性使其在細胞解離過程中表現(xiàn)出溫和的細胞作用特性。因為僅針對特定肽鍵作用，減少了對細胞表面其他蛋白及細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的非特異性損傷。相關(guān)實驗表明，在處理 Jurkat 細胞時，使用 0.05% 胰蛋白酶處理 20 分鐘后，細胞表面 CD2 水平明顯降低，而用 TrypLE Express 試劑處理相同時間的細胞，無明顯 CD2 損失 ，充分證明其在保留細胞表面表位表達方面的優(yōu)勢。對于依賴細胞表面標志物進行分析、分選、鑒定的實驗（如流式細胞術(shù)分析、免疫磁珠分選細胞等），TrypLE Express 酶能夠更好地維持細胞的生物學(xué)特性，保障實驗結(jié)果的可靠性。
以常見的胰蛋白酶為例，它是一種混合酶，除了具備水解賴氨酸和精氨酸 C - 末端肽鍵的活性外，還含有其他蛋白酶活性成分，作用機制相對復(fù)雜。在細胞解離時，多種酶活性同時作用，雖然能夠較快地解離細胞，但容易對細胞造成過度損傷，導(dǎo)致細胞表面蛋白被廣泛切割，影響細胞的后續(xù)生長、分化及功能。例如在神經(jīng)干細胞的解離實驗中，傳統(tǒng)胰蛋白酶處理后的神經(jīng)干細胞，在后續(xù)培養(yǎng)過程中細胞凋亡率明顯升高，且分化為神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細胞的能力受到抑制；而 TrypLE Express 酶解離的神經(jīng)干細胞不僅保持了較高的細胞活性，在誘導(dǎo)分化后，還能夠正常分化為多種神經(jīng)細胞類型，為神經(jīng)干細胞的研究及應(yīng)用提供了更好的細胞基礎(chǔ) 。
在實驗操作上，TrypLE Express 酶極大地簡化了流程。由于其作用位點與傳統(tǒng)胰蛋白酶相似，可直接在現(xiàn)有胰蛋白酶使用方案中進行替換，科研人員無需對實驗條件進行復(fù)雜的優(yōu)化。而且，該酶僅通過稀釋即可實現(xiàn)滅活，無需像胰蛋白酶那樣添加血清或胰蛋白酶抑制劑來終止反應(yīng)。這種特性尤其適用于無血清培養(yǎng)體系，避免了血清成分對實驗結(jié)果的干擾，同時也降低了實驗成本和操作復(fù)雜性，讓實驗操作更加高效、便捷。
傳統(tǒng)胰酶在使用后，通常需要添加血清（血清中的抗蛋白酶成分可抑制胰酶活性）或胰蛋白酶抑制劑來終止反應(yīng)，操作步驟繁瑣。血清的加入不僅增加了實驗成本，還可能引入外源性物質(zhì)，干擾細胞培養(yǎng)環(huán)境，影響實驗結(jié)果的準確性。并且，不同批次血清質(zhì)量存在差異，可能導(dǎo)致實驗重復(fù)性不佳。此外，添加抑制劑也需要精確控制劑量，否則可能影響細胞狀態(tài)，進一步增加了實驗操作的難度和不確定性 。
TrypLE Express 酶在儲存方面具備顯著優(yōu)勢。它在室溫（15 °C - 30 °C）下可穩(wěn)定保存 24 個月，也可選擇 2 °C - 8 °C 冷藏或 - 5 °C - 20 °C 冷凍保存，運輸過程中同樣可在室溫條件下進行。這種寬泛且穩(wěn)定的儲存條件，不僅釋放了實驗室有限的低溫儲存空間，也為實驗操作帶來極大便利。科研人員無需時刻擔憂試劑因儲存溫度問題而失活，在需要使用時隨時可得，有效提升科研效率。
傳統(tǒng)胰酶產(chǎn)品對儲存條件要求較為苛刻，一般需要低溫冷凍保存（-20 °C 甚至更低溫度）以維持其活性。頻繁的凍融循環(huán)會導(dǎo)致酶活性降低，影響實驗效果。而且，在運輸過程中也需要嚴格保持低溫狀態(tài)，否則容易造成酶失活，給試劑的采購、儲存和使用帶來諸多不便，增加了實驗室管理成本和實驗失敗風(fēng)險 。
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