正灰綠青霉的生產(chǎn)條件與形態(tài)特征及應(yīng)用領(lǐng)域與注意事項(xiàng)！

一、菌種簡(jiǎn)介

正灰綠青霉是Penicillium屬的微生物，原產(chǎn)地為阿根廷。主要用途為分類；研究。

二、產(chǎn)品信息

平臺(tái)編號(hào)：Bio-66376

規(guī)格：凍干粉

拉丁屬名：Penicillium Euglaucum

中文名稱：正灰綠青霉

拉丁名稱：Penicillium euglaucum

其它保藏中心編號(hào)：=CBS 323.71

來源歷史：←中科院微生物研究所←CBS

收藏時(shí)間：2007/7/9

原產(chǎn)國：阿根廷

模式菌株：模式菌株

主要用途：分類；研究

特征特性：菌落直徑24mm，顏色為灰綠色，菌落稍厚，表面凸起，具放射狀溝紋和同心環(huán)紋，菌落質(zhì)地為絨狀到絮狀，滲出液為橙色，無可溶性色素，菌落反面顏色為炒米黃，分生孢子呈球形，直徑1.5－2.5μm。

生物危害程度：四類

培養(yǎng)基編號(hào)：CM0072

培養(yǎng)基名稱：麥芽膏瓊脂(Malt Extract Agar)

培養(yǎng)基成分：麥芽膏 20.0g，瓊脂 20.0g，自來水 1.0L，自然pH。

培養(yǎng)溫度：25℃

需氧類型：好氧

分離基物：土壤

保存方法：真空冷凍干燥法

共享方式：公益性共享；資源純交易性共享；合作研究共享；資源交換性共享

提供形式：凍干物

用途：分類；研究；

注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn)）

三、形態(tài)特征

正灰綠青霉，菌落直徑24mm，顏色為灰綠色，菌落稍厚，表面凸起，具放射狀溝紋和同心環(huán)紋，菌落質(zhì)地為絨狀到絮狀，滲出液為橙色，無可溶性色素，菌落反面顏色為炒米黃，分生孢子呈球形，直徑1.5－2.5μm。

四、生產(chǎn)條件

采用響應(yīng)面法對(duì)灰綠青霉PenicilliumglaucumNS16生產(chǎn)纖維素酶的發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化,通過Plackett-Burman實(shí)驗(yàn)方法研究有關(guān)碳源、氮源、無機(jī)鹽、發(fā)酵時(shí)間、搖床轉(zhuǎn)速等18個(gè)發(fā)酵因子對(duì)菌株發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶活力的影響。結(jié)果顯示,影響產(chǎn)酶的顯著因子是麩皮、CMC的含量和發(fā)酵時(shí)間。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果和經(jīng)驗(yàn)方法對(duì)顯著影響因子的取值范圍進(jìn)行預(yù)估,并采用Box-Behnken設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行優(yōu)化,然后應(yīng)用響應(yīng)面模擬預(yù)測(cè)和搖瓶發(fā)酵實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,結(jié)果表明,優(yōu)化發(fā)酵條件為培養(yǎng)基中麩皮6.0 g/L，CMC 710 g/L,發(fā)酵時(shí)間96 h，搖瓶發(fā)酵液中CMC酶活均接近309 IU/mL，優(yōu)化預(yù)測(cè)值和實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證值擬合度達(dá)到99%,比初始培養(yǎng)基和發(fā)酵條件下菌株產(chǎn)CMC酶活94.51IU/mL提高了227。

不同微生物來源的木質(zhì)纖維素降解酶的酶系組成往往不同。Jorgensen H等研究報(bào)道,青霉屬(Penicillium)真菌能分泌出較全的降解天然木質(zhì)纖維素的聚糖酶系,其菌體培養(yǎng)容易、生長(zhǎng)快,產(chǎn)酶活力較高,表現(xiàn)出良好的商業(yè)開發(fā)潛力。

五、應(yīng)用領(lǐng)域

曲霉和根霉產(chǎn)B-葡萄糖苷酶活性較高,而在天然纖維素降解中起重要作用的B-葡聚糖纖維二糖水解酶活力較低。青霉屬真菌不僅能分泌組成齊全、酶活較高的纖維素降解酶系,而且具有易培養(yǎng)和生長(zhǎng)快的優(yōu)勢(shì)。因此,研究灰綠青霉的培養(yǎng)條件及其對(duì)秸稈纖維降解的影響,可以為更好地利用秸稈開辟新的途徑。

纖維素酶是一種誘導(dǎo)酶，在培養(yǎng)和發(fā)酵過程中加入適當(dāng)?shù)恼T導(dǎo)物可以增加酶的產(chǎn)量，麩皮富含微量生長(zhǎng)因子或誘導(dǎo)物和纖維素等碳源物質(zhì)，這些物質(zhì)促進(jìn)菌體的營養(yǎng)生長(zhǎng),比秸稈纖維素更易誘導(dǎo)菌種纖維素酶的產(chǎn)生，但纖維素酶的分泌受纖維二糖和葡萄糖等的阻遏和反饋抑制,低濃度時(shí)有促進(jìn)作用而較高濃度時(shí)便開始抑制，因而應(yīng)該控制麩皮含量.微生物一般對(duì)NH4+離子吸收較快，只有NH4+離子才能進(jìn)入有機(jī)分子中，(NH4)3PO4在被灰綠青霉利用過程中，PO3-4的存在有利于保持菌體生長(zhǎng)過程中培養(yǎng)基的pH相對(duì)穩(wěn)定，不適宜的pH可引起菌體表面電荷改變,影響菌體對(duì)營養(yǎng)物的吸收，使產(chǎn)酶量和酶活力降低。含水量的大小，直接影響菌種的生長(zhǎng)，含水量小，物料容易因水分蒸發(fā)而變干，使發(fā)酵不，產(chǎn)酶量降低，含水量太大,造成微環(huán)境缺氧，夾心現(xiàn)象嚴(yán)重,影響菌體生長(zhǎng)和酶活力。綜合上述分析,可將灰綠青霉產(chǎn)酶的培養(yǎng)基確定為氮源(NH4)3PO4，含水量200 ，pH 4.5，麥稈：麩皮為3：2。

六、誘變育種

以發(fā)酵條件優(yōu)化的菌株 Penicillium glaucum NS3 為出發(fā)菌，采用紫外線、亞硝酸鈉復(fù)合誘變，在 UV( 15W、距30cm 輻照 9min) 、0.3% 亞硝酸鈉協(xié)同誘變條件下，經(jīng)多輪反復(fù)誘變，得到菌株 Penicillium glaucum NS3c1，其發(fā)酵液CMC 酶活和濾紙酶活分別達(dá)到 400． 07 IU / mL 和 9． 47 IU / mL，比出發(fā)菌酶活 309 IU / mL 和 7． 37 IU / mL 分別提高 29．47% 和 28． 35%。

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