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常溫凝膠滲透色譜系統(tǒng)(Gel Permeation Chromatography, GPC)，也稱為尺寸排阻色譜(Sie Exclusion Chromatography, SEC)，是一種基于分子大小分離物質(zhì)的液相色譜技術(shù)。
1.核心原理：凝膠滲透色譜的分析是利用體積排除機(jī)理，色譜柱裝填的是多孔性凝膠或微粒，這些凝膠顆粒具有三維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，其孔徑大小與待分離的高分子化合物分子尺寸相當(dāng)。當(dāng)樣品溶液通過色譜柱時(shí)，較小的分子能夠進(jìn)入凝膠內(nèi)部的孔隙，而較大的分子則只能沿著凝膠顆粒間的空隙流動(dòng)。由于路徑不同，較小分子在柱中的停留時(shí)間較長(zhǎng)，而較大分子則較快地流出色譜柱，從而實(shí)現(xiàn)按分子大小進(jìn)行分離。
2.檢測(cè)方法：在GPC分離過程中，選擇合適的檢測(cè)方法對(duì)于獲得準(zhǔn)確的結(jié)果至關(guān)重要。常見的檢測(cè)方法包括光散射、粘度測(cè)量和折光率檢測(cè)等。其中，光散射檢測(cè)器可以用于檢測(cè)溶液中分子的平均分子質(zhì)量和聚合度，為分析提供重要數(shù)據(jù)支持。
常溫凝膠滲透色譜系統(tǒng)的使用注意事項(xiàng)：
1.環(huán)境要求：常溫凝膠滲透色譜系統(tǒng)需要放置在平穩(wěn)、穩(wěn)定、通風(fēng)的地方，避免受潮或溫度變化過大的環(huán)境。
2.操作規(guī)范：操作人員應(yīng)事先熟悉常溫凝膠滲透色譜儀的使用說明，了解儀器的操作流程和注意事項(xiàng)。操作人員應(yīng)按照儀器操作流程進(jìn)行操作，禁止私自調(diào)整儀器參數(shù)或進(jìn)行不規(guī)范操作。
3.樣品處理：樣品必須溶解在所選的溶劑中，否則會(huì)影響分離效果和檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。對(duì)于難以溶解的樣品，可以嘗試加熱、攪拌、超聲等方法促進(jìn)其溶解。樣品中不能含有顆粒物或雜質(zhì)，以免堵塞色譜柱和儀器的其他部件。在進(jìn)樣前，必須對(duì)樣品進(jìn)行過濾處理。
4.色譜柱保護(hù)：根據(jù)樣品的分子量范圍選擇合適的色譜柱，不同的柱具有不同的分離范圍。定期清洗和再生色譜柱，以去除吸附的雜質(zhì)和恢復(fù)柱效。避免柱干涸，因?yàn)檫@會(huì)損壞固定相并影響分離效果。
5.流動(dòng)相管理：選擇與樣品兼容且不會(huì)對(duì)檢測(cè)器產(chǎn)生干擾的流動(dòng)相。定期更換流動(dòng)相和過濾器，防止流動(dòng)相中的雜質(zhì)和微生物滋生，堵塞色譜柱和儀器的其他部件。
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