CELL-WISE 293 培養(yǎng)基(貨號(hào):CW001)具體說明
CELL-WISE 293 培養(yǎng)基(貨號(hào):CW001)具體說明
產(chǎn)品特性
應(yīng)用場(chǎng)景:專為HEK293 細(xì)胞(如 293-F、293-T、Expi-293F 等)的高密度懸浮培養(yǎng)及瞬時(shí)轉(zhuǎn)染設(shè)計(jì),支持細(xì)胞高效擴(kuò)增與外源基因表達(dá)。
成分優(yōu)勢(shì):
無蛋白、無動(dòng)物源成分、化學(xué)成分wan全限定,排除血清批次差異及病毒污染風(fēng)險(xiǎn),保障實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性與可重復(fù)性。
即用型配方,無需額外添加成分,開瓶后可直接使用,簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)操作流程。
技術(shù)參數(shù)
項(xiàng)目 | 指標(biāo) |
外觀 | 澄清透明紅色液體 |
滲透壓 | 275±15 mOSM |
pH 值 | 6.9~7.4 |
無菌檢測(cè) | 無菌(通過無菌培養(yǎng)驗(yàn)證) |
內(nèi)毒素 | <5 EU/mL |
儲(chǔ)存條件 | 2~8℃,避光保存 |
有效期 | 12 個(gè)月(未開封) |
產(chǎn)品用途
僅限科學(xué)研究使用(如重組蛋白生產(chǎn)、病毒載體包裝等),嚴(yán)禁用于人類或動(dòng)物的診斷、治療及臨床應(yīng)用。
細(xì)胞馴化操作指南
一、直接馴化(適用于多數(shù)細(xì)胞株)
若細(xì)胞已適應(yīng)無血清懸浮培養(yǎng)體系,可直接通過常規(guī)傳代稀釋更換為 Balance CD 293 培養(yǎng)基,無需逐步過渡。
二、漸進(jìn)式馴化(適用于敏感細(xì)胞或傳統(tǒng)培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞)
注意事項(xiàng):選擇 ** 低代次(≤P10)、處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期(活率 > 95%)** 的細(xì)胞進(jìn)行馴化。
操作步驟:
基礎(chǔ)傳代階段
在原培養(yǎng)基中復(fù)蘇細(xì)胞,連續(xù)傳代2~3 次至生長(zhǎng)狀態(tài)穩(wěn)定。
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá) 2×10? cells/mL 時(shí),以 0.5~0.6×10? cells/mL 的密度傳代,使用 75% 原培養(yǎng)基 + 25% Balance CD 293 培養(yǎng)基 的混合體系。
培養(yǎng)條件
環(huán)境:37℃,5% CO?,恒溫?fù)u床轉(zhuǎn)速 110~175 rpm(根據(jù)培養(yǎng)體積調(diào)整)。
比例遞增階段
培養(yǎng) 3~4 天后,若細(xì)胞密度達(dá) 3×10? cells/mL 且活率 > 90%,傳代時(shí)調(diào)整混合比例為 50% 原培養(yǎng)基 + 50% Balance CD 293 培養(yǎng)基,接種密度維持 0.5×10? cells/mL。
若細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢:可離心保留 20% 條件培養(yǎng)基,加入 80% 新配的 75% 原培養(yǎng)基 + 25% Balance CD 293 培養(yǎng)基 繼續(xù)培養(yǎng)。
wan全切換階段
重復(fù)上述步驟,逐步提高 Balance CD 293 培養(yǎng)基比例(如 25:75→10:90),直至wan全使用 100% 目標(biāo)培養(yǎng)基。
適應(yīng)驗(yàn)證
細(xì)胞在 100% 培養(yǎng)基中傳代3~4 次后,若密度達(dá) 2~3×10? cells/mL 且活率 > 90%,即完成馴化。
后續(xù)傳代起始密度可降至 0.3×10? cells/mL,建議再傳代2~3 次后進(jìn)行轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)。
重要提示:
馴化初期(前 3 代)細(xì)胞狀態(tài)可能波動(dòng),通常從第 4 代起逐漸改善。
馴化過程中需定期監(jiān)測(cè)細(xì)胞密度、活率及形態(tài),避免污染或代謝物積累影響細(xì)胞適應(yīng)。
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