使用二氧化碳搖床(CO?搖床)時(shí),需注意以下關(guān)鍵事項(xiàng)以確保實(shí)驗(yàn)安全、設(shè)備穩(wěn)定及細(xì)胞培養(yǎng)效果:
1. 安全操作
氣體安全:
確認(rèn)CO?氣瓶固定牢固,連接管路無泄漏(可用肥皂水檢測)。
避免CO?濃度過高(通常維持5% 10%),防止人員窒息或培養(yǎng)環(huán)境失衡。
實(shí)驗(yàn)室需通風(fēng)良好,必要時(shí)安裝CO?監(jiān)測報(bào)警器。
電氣安全:
檢查電源電壓與設(shè)備匹配,接地可靠。
避免液體濺入設(shè)備內(nèi)部,防止短路。
2. 設(shè)備準(zhǔn)備與校準(zhǔn)
滅菌與清潔:
使用前用70%乙醇或?qū)S孟緞┎潦脙?nèi)腔,紫外照射(如有)30分鐘以上。
定期清理水盤(濕度控制型),防止微生物污染。
校準(zhǔn)與驗(yàn)證:
定期校準(zhǔn)CO?傳感器(建議每6個(gè)月一次),確保濃度準(zhǔn)確。
驗(yàn)證溫度均勻性(±0.5℃以內(nèi))和搖床轉(zhuǎn)速穩(wěn)定性。
3. 參數(shù)設(shè)置
培養(yǎng)條件:
典型設(shè)置:37℃、5% CO?(哺乳動(dòng)物細(xì)胞),根據(jù)細(xì)胞類型調(diào)整。
濕度控制:保持≥95%濕度(開放式培養(yǎng)皿需加水盤或濕度模塊)。
搖床參數(shù):
轉(zhuǎn)速范圍:通常30 300 rpm,避免過高轉(zhuǎn)速導(dǎo)致細(xì)胞損傷或液體飛濺。
振幅選擇:根據(jù)容器類型(如培養(yǎng)瓶、孔板)調(diào)整擺動(dòng)幅度。
4. 使用中的注意事項(xiàng)
樣品擺放:
均勻分布負(fù)載,避免偏心放置導(dǎo)致不平衡或噪音。
容器密封性檢查(如擰緊瓶蓋),防止培養(yǎng)基蒸發(fā)或污染。
實(shí)時(shí)監(jiān)控:
記錄運(yùn)行參數(shù)(溫度、CO?、轉(zhuǎn)速),觀察設(shè)備是否異常(噪音、報(bào)警)。
*次運(yùn)行或更換條件時(shí),建議每隔幾小時(shí)確認(rèn)環(huán)境穩(wěn)定性。
5. 維護(hù)與故障處理
日常維護(hù):
每周檢查CO?管路、過濾器是否堵塞,水盤是否清潔。
長期停用時(shí)排空水盤,關(guān)閉氣源并斷電。
常見問題:
CO?濃度不穩(wěn)定:檢查氣瓶壓力、傳感器或管路漏氣。
溫度波動(dòng):確認(rèn)門密封性,或校準(zhǔn)溫度探頭。
如遇持續(xù)報(bào)警,立即聯(lián)系廠家技術(shù)支持。
6. 其他提示
節(jié)能建議:夜間可調(diào)低轉(zhuǎn)速或溫度(如25℃),但需確保細(xì)胞耐受。
兼容性:確認(rèn)培養(yǎng)容器材質(zhì)(如PETG瓶)耐CO?滲透,避免pH漂移。
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