液相色譜柱是液相色譜分析中的核心部件,其性能直接影響到分析的準確性和效率。液相色譜柱的分離原理基于樣品組分在固定相和流動相之間的分配差異,通過差速遷移實現(xiàn)不同組分的分離。
液相色譜柱基于溶質(zhì)在固定相和流動相之間的分配平衡進行分離。當流動相攜帶溶質(zhì)流經(jīng)色譜柱時,溶質(zhì)會在固定相和流動相之間發(fā)生吸附、解吸、分配等過程,從而實現(xiàn)溶質(zhì)的分離。固定相的選擇、柱子的尺寸、填料粒徑等因素都會影響色譜柱的分離效果。
按用途分類:
分析型色譜柱:用于樣品分析和檢測,內(nèi)徑通常為2-5mm,填料粒徑為3-10μm,柱長10-30cm。
制備型色譜柱:用于樣品制備和純化,內(nèi)徑40-100mm,填料粒徑10-50μm,柱長50-125cm。
保護柱:安裝在分析柱前面,防止樣品中顆粒物或強保留物質(zhì)污染分析柱,延長其使用壽命。
選購:
1、根據(jù)分析對象選擇:根據(jù)待測溶質(zhì)的極性、分子量、化學性質(zhì)等選擇合適的色譜柱。
2、根據(jù)分離效果選擇:考慮分離度、峰形、分析時間等因素,選擇能夠提供好的分離效果的色譜柱。
3、根據(jù)柱子尺寸和填料粒徑選擇:柱子長度、內(nèi)徑、填料粒徑等參數(shù)會影響分析效率和分離效果,應根據(jù)實際需求進行選擇。
日常維護
沖洗:使用前后用流動相沖洗柱子,避免鹽沉積或樣品殘留。
保存:短期保存用有機溶劑(如甲醇),長期保存需封端并避免**pH或溫度。
壓力監(jiān)測:柱壓突然升高可能因篩板堵塞或固定相板結(jié),需反沖或更換柱子。
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