支原體是實驗室中常見的污染細胞的原核生物,污染主要來源包括細胞和毒種,以及血清、雞胚、原代細胞等動物性原材料和操作者本身,數(shù)據(jù)顯示,約有 15%-35%的細胞存在支原體污染。支原體會改變宿主細胞的結構和功能等一系列特征,造成實驗結果不準確;干擾細胞代謝和生長,改變核酸合成,影響細胞抗原性,導致染色體改變,干擾病毒復制以及模仿病毒的作用。因此,檢測并去除支原體,對細胞培養(yǎng)非常重要,可以說要想細胞養(yǎng)得好,支原體去除不可少。
去除細胞支原體污染,面臨的第一個挑戰(zhàn)就是如何檢測細胞中可能存在的支原體污染。支原體是一類無細胞壁、直徑約 0.1-0.3 μm 的原核微生物,常規(guī)的革蘭氏染色無效,光學顯微鏡下難以觀察。而且,部分支原體(如口腔支原體)可與宿主細胞建立潛伏感染,不引起明顯細胞病變,難以察覺。
經(jīng)典的檢測支原體的方法是培養(yǎng)法及指示細胞法,但兩種方法耗時太久,且培養(yǎng)條件相對較為苛刻,在過程中易受污染,造成檢測結果偏差?;谏茖W的發(fā)展,目前已有一些更為高效和準確的方法來替代傳統(tǒng)方法。依據(jù)《歐洲藥典》中<2.6.7>中指出,在適當?shù)尿炞C之后,核酸擴增技術NAT可以代替培養(yǎng)法和指示細胞培養(yǎng)法。NAT法靈敏度高,耗時也相對較短?;谥гw特異性激酶的表達情況的生化檢測法,則耗時更短,在20-30min內(nèi)即可完成對支原體的檢測,靈敏度也接近NAT法,更適合于對支原體污染進行快速檢測判斷。
| 培養(yǎng)法 | 指示細胞法 | NAT(核酸擴增技術) | 生化法 |
時間 | 28 天 | 4-5 天 | 2-5 小時 | 20 分鐘 |
靈敏度 | 10 cfu/mL | 100 cfu/mL | 10 cfu/mL | 50 cfu/mL |
特異性 | 沒有單一方法的特異性能達到 100%,通常用兩種方法組合以提高特異性 |
表1:常用的支原體檢測方法對比
愛必信針對支原體檢測,推出兩款快速檢測產(chǎn)品,分別基于NAT和激酶生化檢測技術,半小時內(nèi)即可完成檢測,靈敏度高達10 cfu/mL,助力快速檢測支原體污染。
abs90062 一步法快速支原體檢測試劑盒(等溫擴增法),利用等溫擴增技術與可視化顏色變化能夠快速檢測細胞培養(yǎng)液中常見的 8 種支原體。30 min內(nèi)搞定檢測,無需儀器。
產(chǎn)品特點:
1、等溫擴增技術,靈敏度高;
2、操作簡單,無需PCR儀及開蓋電泳;
3、實驗快速,30 min即可完成實驗;
4、無需檢測儀器,結果可視化;
abs90283 MYCO-LTM 熒光素酶支原體檢測試劑盒,可特異性的檢測活支原體產(chǎn)生的真核細胞不表達的激酶,這些激酶可以將 ADP 轉化為 ATP。能夠30 min內(nèi)快速檢測包括常見的8種和其他多種常見活支原體。
產(chǎn)品特點:
1、生物發(fā)光檢測,靈敏度高;
2、操作簡單,均相反應,兩次讀數(shù);
3、實驗快速,30 min即可完成實驗;
4、信噪比高,媲美進口Lon**品牌;
其他支原體檢測產(chǎn)品
貨號 | 品名 | 規(guī)格 | 原理特點 |
abs90062 | 一步法快速支原體檢測試劑盒(等溫擴增法) | 50T | 等溫擴增,30min快檢,無需PCR儀,可視結果。 |
abs90283 | MYCO-LTM 熒光素酶支原體檢測試劑盒 | 10 & 25 & 50T | 支原體激酶發(fā)光法,靈敏度接近NAT法,20min快檢。 |
abs90199 | 發(fā)光法支原體檢測試劑盒 | 20 & 200T | 支原體激酶發(fā)光法,30 min完成實驗。 |
abs9252 | 支原體染色檢測試劑盒 | 100T | Hoechst染色檢測,形態(tài)觀測 |
abs9588 | 支原體檢測試劑盒(PCR法) | 50T | NAT法PCR檢測,需電泳 |
abs9925 | 支原體檢測試劑盒(qPCR法) | 50T | NAT法,qPCR檢測,Taqman 探針,qPCR儀實時讀數(shù) |
abs90284 | MYCO-T™巢式PCR支原體檢測試劑盒 | 25 & 50T | NAT法,巢式PCR,兩步擴增,靈敏度更高,需電泳 |
除檢測試劑外,愛必信還提供全套支原體預防及清除試劑,助力遠離支原體困擾
貨號 | 品名 | 規(guī)格 | 特點 |
abs9253 | 支原體清除試劑 | 20mg/100mg | 多肽類,無抗藥性 |
abs9254 | 支原體清除試劑Plus | 10mg | 天然抗生素,可預防可清除 |
abs9376 | 支原體預防劑 | 500uL/500uLx4 | 多肽類,無抗藥性 |
abs9843 | 清除支原體噴劑 | 280mL | 多肽類,5-10min可根chu |
愛必信其他常用熱賣細胞培養(yǎng)污染清除產(chǎn)品
貨號 | 品名 | 規(guī)格 |
abs9244 | 青霉素-鏈霉素溶液(100x,雙抗) | 100mL |
abs9245 | 青霉素-鏈霉素-慶大霉素混合溶液(100x,三抗) | 100mL |
abs9246 | 青霉素-鏈霉素-兩性霉素B混合溶液(100x,三抗) | 100mL |
abs42018967 | 硫酸慶大霉素溶液 | 10mL |
abs9596 | 青霉素G鈉鹽溶液(100x) | 100mL |
abs9593 | 兩性霉素B溶液(10mg/mL) | 10mL |
abs9594 | 制霉菌素溶液(10mg/mL) | 10mL |
abs9595 | 鹽酸環(huán)丙沙星溶液(20mg/mL) | 10mL |
abs9841 | 黑膠蟲清除劑PLUS(500x) | 400uLx5 |
abs9842 | 黑膠蟲預防劑(1000x) | 500uLx5 |
abs9371 | 水浴鍋抑菌劑 | 100mL |
abs9372 | 培養(yǎng)箱除菌劑 | 480mL |
abs9373 | 細胞房除菌劑 | 480mL |
abs9374 | 水盤抑菌劑 | 20mL |
支原體污染防控需貫穿 “檢測 - 清除 - 預防” 全流程
定期檢測:對珍貴細胞株建議每傳代一次進行 NAT 或生化法檢測;
應急處理:發(fā)現(xiàn)污染后立即使用 abs9253 等清除試劑,配合傳代離心法降低支原體載量;
環(huán)境管控:使用專用消毒劑定期處理培養(yǎng)箱、超凈臺,血清等耗材需嚴格質檢。
通過專業(yè)化的檢測產(chǎn)品與標準化操作流程,可有效構建細胞培養(yǎng)的支原體防護屏障,保障科研實驗的穩(wěn)定性與可靠性。
Absin產(chǎn)品線:
爆款產(chǎn)品:試劑盒(mIHC、IHC、凋亡、ELISA、ChIP、Co-IP、TR-FRET、生化檢測、殘留檢測、多因子檢測);細胞培養(yǎng)(類器官試劑盒+基質膠,胎牛血清+培養(yǎng)添加劑+細胞因子)、分化試劑盒;分子(mRNA合成服務+提取試劑盒);化合物大包裝;輔助試劑、耗材/儀器、定制服務(抗體/多肽/蛋白/標記/檢測)...
特色產(chǎn)品:雞胚提取物CEE、B27、N2、霍亂毒素B亞單位CTB、牛腦垂體提取物BPE、百日咳毒素PTX、重組人胰島素Insulin、人源低密度脂蛋白LDL...
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