源自小鼠皮膚組織的細(xì)胞類型特異性外泌體的標(biāo)記、分離和表征

細(xì)胞外囊泡是一組參與細(xì)胞間通訊的異質(zhì)膜結(jié)合囊泡，在質(zhì)膜（外泌體）或通過(guò)內(nèi)吞作用（外泌體）形成。迄今為止，大多數(shù)外泌體研究都集中在體外系統(tǒng)或源自體液的外泌體上，而組織源性的外泌體仍未得到充分探索。在這里，我們提出了一種使用細(xì)胞類型特異性啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的報(bào)告基因構(gòu)建體的方案，用于靶向標(biāo)記和隨后從小鼠組織體內(nèi)特定細(xì)胞類型中分離外泌體。由于目前主要基于大小、密度或表面標(biāo)記的分離技術(shù)的局限性，外泌體和外泌體之間的區(qū)分仍然具有挑戰(zhàn)性。為了解決這個(gè)問(wèn)題，我們的方法利用基因工程來(lái)特異性標(biāo)記外泌體，從而能夠從復(fù)雜的異質(zhì)細(xì)胞外囊泡生物庫(kù)中精確識(shí)別和分離它們。通過(guò)電子顯微鏡、納米顆粒跟蹤分析、抗體外泌體陣列測(cè)定和其他成熟技術(shù)對(duì)分離的細(xì)胞類型特異性外泌體進(jìn)行表征。外泌體的標(biāo)記和分離持續(xù) 2-3 天，旨在讓具有基本實(shí)驗(yàn)室能力的研究人員能夠訪問(wèn)。該協(xié)議通過(guò)能夠從單個(gè)細(xì)胞類型或多種細(xì)胞類型組合中分離出細(xì)胞類型特異性外泌體，促進(jìn)外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞通訊的研究。該方案中的大多數(shù)實(shí)驗(yàn)都使用了小鼠傷口邊緣皮膚組織，但原則上，該方案也可以應(yīng)用于其他組織以分離外泌體，并根據(jù)需要進(jìn)行一些修改。這種方法為探索細(xì)胞類型特異性外泌體在細(xì)胞間通訊中的功能作用開(kāi)辟了新途徑。

原標(biāo)題：Labeling, isolation and characterization of cell-type-specific exosomes derived from mouse skin tissue

通訊作者：Chandan K. Sen & Subhadip Ghatak

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