超微量分光光度計(jì)的7個(gè)關(guān)鍵操作技巧與常見誤區(qū)

來(lái)源：翱藝儀器（上海）有限公司 2025年09月19日 13:38

　關(guān)鍵操作技巧

　　樣品預(yù)處理與均勻性：確保樣品充分混合，避免沉淀或顆粒導(dǎo)致吸光度波動(dòng)。例如，核酸樣品需低速離心去除氣泡，蛋白質(zhì)樣品需避免表面張力變化影響液柱形成。

　　微量加樣控制：僅需1-2μL樣品，使用移液器精準(zhǔn)加樣至檢測(cè)平臺(tái)中心，防止液體外溢或殘留。對(duì)于高粘度樣品，可適當(dāng)增加加樣量至2-3μL。

　　基線校準(zhǔn)：每次測(cè)量前用空白溶劑（如水或緩沖液）調(diào)零，尤其更換溶劑類型或長(zhǎng)時(shí)間未使用時(shí)，避免殘留物干擾光路。

　　波長(zhǎng)與模式選擇：根據(jù)檢測(cè)目標(biāo)選擇波長(zhǎng)（如核酸選260nm，蛋白質(zhì)選280nm），并匹配對(duì)應(yīng)算法（如dsDNA、ssDNA、RNA或BSA蛋白模式）。

　　避免光路干擾：測(cè)量時(shí)關(guān)閉樣品室蓋子，防止外界光線干擾；同時(shí)遠(yuǎn)離強(qiáng)光、強(qiáng)氣流或電磁場(chǎng)環(huán)境。

　　重復(fù)測(cè)量與數(shù)據(jù)平均：對(duì)同一樣品進(jìn)行3次測(cè)量并取平均值，減少偶然誤差，提升結(jié)果可靠性。

　　清潔與維護(hù)：測(cè)量后立即用無(wú)塵紙或乙醇清潔檢測(cè)平臺(tái)，避免交叉污染；定期檢查光源壽命（鹵素?zé)艏s2000小時(shí)），及時(shí)更換老化組件。

　　常見誤區(qū)與解決方案

　　樣品污染：若260/230比值低于1.8，可能存在有機(jī)溶劑（如苯酚）污染。需重新純化樣品，并用去離子水清潔檢測(cè)基座。

　　吸光度不穩(wěn)定：由樣品未覆蓋檢測(cè)表面或氣泡導(dǎo)致。應(yīng)確保液滴覆蓋光纖表面，并使用“平滑數(shù)據(jù)”功能處理波動(dòng)讀數(shù)。

　　濃度與預(yù)期不符：高濃度樣品（如A260>2.0）可能超出線性范圍，需稀釋后復(fù)測(cè)；同時(shí)結(jié)合多波長(zhǎng)比值（如A260/A280）評(píng)估純度，避免單一代數(shù)值誤判。

　　環(huán)境干擾：溫度波動(dòng)或陽(yáng)光直射會(huì)影響光源穩(wěn)定性。建議將儀器置于恒溫環(huán)境（如25℃±2℃），并避免陽(yáng)光直射。

　　軟件報(bào)錯(cuò)或連接故障：常見于驅(qū)動(dòng)程序不兼容或USB接口松動(dòng)。需更新軟件至最新版本，并檢查接口連接是否穩(wěn)固。

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