α-Bungarotoxin, AF532用于細(xì)胞與重組蛋白標(biāo)記研究

一、試劑參數(shù)

英文名稱(chēng)：α-Bungarotoxin, AF532，α-Bungarotoxin, Alexa Fluor 532

純度：95％+

規(guī)格：1mg，5mg，10mg（可按需包裝）

溶解性：溶于DMF、DMSO等部分有機(jī)溶液。

儲(chǔ)存條件：不超-20℃干燥、避光儲(chǔ)存

注意事項(xiàng)：現(xiàn)配現(xiàn)用，不可頻繁解凍

產(chǎn)品用途：只可用于科研，不可用于人體

供應(yīng)商：西安凱新生物科技

二、組成與結(jié)構(gòu)

1.α-Bungarotoxin（α-BTX）：

來(lái)源：提取自中國(guó)臺(tái)灣銀環(huán)蛇（Bungarus multicinctus），是一種突觸后神經(jīng)。

結(jié)構(gòu)：由74個(gè)氨基酸殘基組成單鏈多肽，分子量約為8 kDa。包含5個(gè)二硫鍵（Cys-Cys橋），形成穩(wěn)定的“三指結(jié)構(gòu)”（three-finger domain）。其三維結(jié)構(gòu)包含α-螺旋和β-折疊片，通過(guò)二硫鍵和非共價(jià)作用維持穩(wěn)定性。

功能：以親和力和特異性結(jié)合nAChRs的α1亞基，尤其是肌肉型（α1β1γδ）和神經(jīng)元型（如α7）亞基。通過(guò)不可逆結(jié)合阻斷乙酰膽堿與受體的結(jié)合，抑制離子通道開(kāi)放。

2.Alexa Fluor 532（AF532）：

類(lèi)型：羅丹明衍生物熒光染料。

光譜特性：激發(fā)波長(zhǎng)約531 nm，發(fā)射波長(zhǎng)約554 nm，呈現(xiàn)橙紅色熒光。

化學(xué)性質(zhì)：通常以NHS酯（琥珀酰亞胺酯）形式存在，可與蛋白質(zhì)中的伯胺（如賴(lài)氨酸殘基）共價(jià)結(jié)合。

優(yōu)勢(shì)：高熒光量子產(chǎn)率、高光穩(wěn)定性、pH不敏感（穩(wěn)定范圍pH 4-10），適用于生物樣品環(huán)境。

三、核心應(yīng)用領(lǐng)域

1.神經(jīng)肌肉接頭研究

煙堿型乙酰膽堿受體（nAChR）成像：通過(guò)熒光標(biāo)記（如AF532、Cy5、FITC等）可視化受體在細(xì)胞膜或組織中的分布，分析受體密度、聚集狀態(tài)及動(dòng)態(tài)變化。

2.突觸生物學(xué)研究

共定位分析：與綠色熒光蛋白（GFP）標(biāo)記的突觸前成分（如突觸囊泡蛋白）聯(lián)用，解析突觸后nAChR與突觸前結(jié)構(gòu)的空間關(guān)聯(lián)。

神經(jīng)回路追蹤：結(jié)合立體定位注射技術(shù)，追蹤特定腦區(qū)（如腹側(cè)被蓋區(qū)VTA）投射神經(jīng)元的nAChR分布。

3.藥物機(jī)制研究

高通量篩選：通過(guò)熒光信號(hào)變化評(píng)估藥物對(duì)nAChR內(nèi)化、降解或再循環(huán)的影響，篩選靶向藥物（如α7受體激動(dòng)劑/拮抗劑）。

4.受體分離與純化

親和柱分離：生物素化α-Bungarotoxin（Biotin-XX-α-BTX）與親和素/鏈霉親和素基質(zhì)結(jié)合，用于nAChR純化。

定位檢測(cè)：酶標(biāo)或熒光團(tuán)標(biāo)記的抗生物素蛋白偶聯(lián)物可定位生物素-XX-α-BTX標(biāo)記的nAChR。

5.細(xì)胞與重組蛋白標(biāo)記

GABAA受體亞群檢測(cè)：α-BTX可間接標(biāo)記表達(dá)GABAA受體亞群的細(xì)胞。

重組蛋白標(biāo)記：標(biāo)記表達(dá)α-BTX結(jié)合位點(diǎn)（BBS）表位標(biāo)簽的融合蛋白，追蹤蛋白定位與功能。

四、相關(guān)試劑

AF532 tyramide，AlexaFluor532 TSA

AF532 PEG4 biotin conjugate

AF532 C5 Maleimide，Alexa Fluor532 C5 Mal

6-Rhodamine 6G NHS ester，6-羅丹明6G活化酯，羅丹明染料

216699-37-5;793646-39-6;180144-70-1

Mito-Tracker Red；線(xiàn)粒體紅色熒光探針；167095-09-2

167095-09-2

(4E)-TCO-PNB ester

1354323-64-0

DBCO-(CH2)3-NH2 TFA

1386999-75-2

121148-00-3；N-Boc-trans-4-amino-L-proline methyl ester

121148-00-3

Sulfo-Cyanine5 azide（乙基），Sulfo-Cy5 N3

1621101-43-6

HA-FITC；Hyaluronate fluorescein；熒光素修飾透明質(zhì)酸

HA-MAc；Hyaluronate Methacrylate；透明質(zhì)酸-甲基丙烯酸酯

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