一、材料和方法
1. 材料
(1)材料取自當(dāng)年帶芽莖段為外植體,采自哈爾濱市農(nóng)業(yè)*宿根花卉園。
(2)培養(yǎng)基以MS 為基本培養(yǎng)基,附加不同的激素配比。啟動(dòng)、增殖培養(yǎng)基加蔗糖30 g/L ,生根培養(yǎng)基加蔗糖15 g/L 。各培養(yǎng)基均加瓊脂6.0g / L , pH 5.8 -6.0 , 121℃ 條件下滅菌20 min 。
2. 方法
(1)初代培養(yǎng)取宿根福祿考當(dāng)年生幼嫩的枝條,剪去葉片,先用軟毛刷蘸洗衣粉水輕刷干凈,然后用流水沖洗。將枝條剪成一芽一段,用70%的酒精消毒30s后,用0.1%的升汞溶液消毒8-10 min ,用無菌水沖洗5 -8 次。接種到啟動(dòng)培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)容器用100 mL 三角瓶,每瓶裝30 -40 mL 培養(yǎng)基,每天觀察并統(tǒng)計(jì)各外植體在培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況。
(2)繼代與增殖將在新長(zhǎng)出的宿根福祿考切成單個(gè)帶芽莖段接種到增殖培養(yǎng)基中,可多次反復(fù)切割進(jìn)行繼代培養(yǎng),采用相同培養(yǎng)基上的材料進(jìn)行增殖,30d 后統(tǒng)計(jì)增殖倍數(shù)。
(3)生根培養(yǎng)在繼代過程中選擇2 ~ 3cm 高的健壯苗,轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中。比較MS 和1 / 2 MS 兩種培養(yǎng)基試管苗生根的情況,從而篩選出zui適的生根培養(yǎng)基。
(4)培養(yǎng)條件培養(yǎng)室溫度(25 士2 )℃ ,光照強(qiáng)度2 000 一3 000 lx ,光周期12h / d。
二、結(jié)果與分析
(1)初代培養(yǎng)基的篩選
30d 后統(tǒng)計(jì)各種外植體的出芽情況,由實(shí)驗(yàn)可知,啟動(dòng)培養(yǎng)基MS 十6-BA 1.0 mg/L 十NAA 0.1 mg/L + 30g蔗糖為*處理,芽誘導(dǎo)率76.6 %。
(2)增殖培養(yǎng)基的篩選
以MS為基本培養(yǎng)基,通過*隨機(jī)區(qū)組試驗(yàn),篩選*增殖培養(yǎng)基。由實(shí)驗(yàn)可知,增殖培養(yǎng)基*配方是MS 十6-BA 1.0mg/L + NAA 0.3 mg/L 十30g 蔗糖,平均增殖倍數(shù)達(dá)7.5 ,不但增殖倍數(shù)高,而且分化的芽均勻一致、生長(zhǎng)快且健壯。
(3)生根培養(yǎng)基的篩選
在生根培養(yǎng)時(shí)選擇了MS 和1 /2MS 培養(yǎng)基,添加了NAA 、IBA ,糖為15g 。選擇繼代中高度在2-3cm 的健壯無根苗,轉(zhuǎn)移到生根培基上,1 個(gè)月后統(tǒng)計(jì)生根的結(jié)果,從實(shí)驗(yàn)可知,zui適生根培養(yǎng)基為1 / 2 MS 十IBA 0.5 mg/L 十15g 蔗糖,IBA 生根效果優(yōu)于NAA 。
(4)移栽
選擇生根培養(yǎng)30d 的健壯生根苗在溫室中進(jìn)行移栽,移栽1 個(gè)月以后,統(tǒng)計(jì)不同移栽基質(zhì)中的成活率,由實(shí)驗(yàn)可知,在溫室中,珍珠巖:草炭為2 : l 的效果,移栽成活率分別達(dá)到88.50 % ,明顯優(yōu)于基質(zhì)珍珠巖。
三、討論
宿根福祿考品種多,耐高溫、耐嚴(yán)寒、耐鹽堿土的能力強(qiáng),是黑龍江省優(yōu)良的宿根花卉,因此實(shí)現(xiàn)宿根福祿考栽培技術(shù)創(chuàng)新,達(dá)到規(guī)模化、專業(yè)化生產(chǎn)很有意義,該試驗(yàn)結(jié)果表明,采取宿根福祿考幼嫩枝條的腋芽誘導(dǎo)率較高,污染率低,是理想的外植體材料。宿根福祿考啟動(dòng)的*培養(yǎng)基為MS 十6-BA 1.0 mg/L 十NAA 0.1mg/L + 30g 蔗糖,培養(yǎng)30d 后萌發(fā)率達(dá)76.6 %。增殖的*培養(yǎng)基為MS + 6-BA 1.0mg/L + NAA0.3 mg / L 十30g蔗糖,月平均增殖倍數(shù)為7.5 。生根的zui適培養(yǎng)基為1 / 2 MS 十IBA 0.5mg/L 十15g 蔗糖,1 個(gè)月后生根率達(dá)97.5 %。試驗(yàn)苗移栽田間,30d 后成活率達(dá)88.50 %。
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