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低速離心機(jī)在分離淋巴細(xì)胞中的應(yīng)用

來源:廣州市默菲儀器有限公司   2013年05月24日 13:49  

 

 
Metrizozte-Ficoll法分離血液時(shí),淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞在同一區(qū)帶,但是單核細(xì)胞具有吞噬膠態(tài)鐵顆粒的能力,使其密度明顯增加,用梯度法可使這兩種細(xì)胞獲得分離。
抗凝靜脈血在低速離心機(jī)中以600g離心10分鐘,分離出白細(xì)胞,大約1ml,與1ml膠態(tài)鐵懸浮液混合,在37℃、搖動(dòng)孵育30分鐘,加入等體積的0.9%NaCl溶液,并鋪放在3ml Metrizozte-Ficoll介質(zhì)上,600g離心20分鐘,離心后淋巴細(xì)胞在分界面處形成區(qū)帶。
另外,淋巴細(xì)胞比單核細(xì)胞對(duì)滲透敏感,增加梯度介質(zhì)的滲透壓,淋巴細(xì)胞更容易失水收縮,密度增加??捎貌煌瑵B透壓的Nycodenz-NaCl梯度從富含白細(xì)胞的血漿中分離單核細(xì)胞。當(dāng)暴露于高滲介質(zhì)中,淋巴細(xì)胞密度增加明顯,易于通過屏障介質(zhì),單核細(xì)胞密度也增加,使之產(chǎn)量下降。使用密度為1.062g/cm3 Nycodenz梯度,滲透壓在310mOsm時(shí)可獲得高純度的單核細(xì)胞,但產(chǎn)量會(huì)受到一些影響。

湖南湘立研制生產(chǎn)的幾款醫(yī)用離心機(jī)可以用來進(jìn)行細(xì)胞分離,如DL5M/TDL5M兩種型號(hào)的低速冷凍離心機(jī)可用來進(jìn)行干細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。XL03RH型控溫離心機(jī)(低速冷凍離心機(jī))可用來進(jìn)行溫度敏感型人體細(xì)胞分離。

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