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高速液相色譜方法解析

來源:昂奇科技(上海)有限公司    2015年03月16日 01:36  

       在生物工程中,作為代謝產(chǎn)生的物質(zhì)群種在分離、精制過程中,生理物質(zhì)容易失去活性,而且被分離物的分布范圍甚廣,如在水相溶液中時,性質(zhì)相類似的蛋白質(zhì)、氨基酸、核酸(DNA、NRA),抗體以及含有遺傳基因結(jié)構(gòu)的生物物質(zhì),用通常的化學方法很難進行分離。

  80年代中期,采用高速液相色譜方法,便有效地解決了這一困難,顯示了多孔玻璃作為液相色譜新填充介質(zhì)的良好特性和應用前景。

  該法是利用多孔玻璃作為載體填充到色譜柱中,在分離液高速通過時,流過的物質(zhì)可因分子量大小不同而分離開來。

  多孔玻璃由于具有納米級的細孔,且孔徑分布窄,微孔結(jié)構(gòu)均勻,同時耐微生物的侵蝕,所以能夠取得良好的分離效果。

  一般情況下,載體孔徑越大,物質(zhì)在其中滯留時間越短,流出速度就越快,反之,分子量大的物質(zhì)滯留時間長,流出速度就慢。

  由于新制得的多孔玻璃內(nèi)孔常堆積有無定形硅膠,使多孔結(jié)構(gòu)不規(guī)則,表面特性差,為了提高其分離效果,常常需要將制得的多孔玻璃進行某些修飾處理,例如用堿除去某些無定形硅;或?qū)⑵涔柰榛?、氨基化、醛基化、酸基化等,使其表面改性,正確控制多孔玻璃載體的孔徑是獲得良好分離效果的重要因素,而表面烷基化修飾處理,則有助于重現(xiàn)性的提高。

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