奧林巴斯顯微鏡基礎(chǔ)知識

日前，Nature旗下的Scientific Reports 刊登了中國科學(xué)院西安光學(xué)精密機(jī)械研究所瞬態(tài)光學(xué)與光子技術(shù)國家重點實驗室姚保利研究組題為Full-color structured illumination optical sectioning microscopy 的研究論文。
　　*，色彩（光譜）信息是描述物體特征的一個重要物理量。三維物體彩色層析成像技術(shù)是獲取物體表面形態(tài)特征的重要手段，也是真實物體三維數(shù)字化的基礎(chǔ)。以激光共聚焦掃描顯微鏡為代表的點掃描顯微成像技術(shù)具有三維層析成像能力，但是逐點掃描整個三維樣品需要較長的時間，而且視場很小，目前僅應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)顯微成像領(lǐng)域。條紋投影法和白光相移干涉法是較為成熟的三維物體表面成像與測量技術(shù)，得到了廣泛的應(yīng)用，這兩種技術(shù)結(jié)合三維貼圖技術(shù)（3D mapping）都可以近似得到三維物體的表面顏色信息，但是貼圖技術(shù)的缺點是圖像畸變大而且分辨率不高。同時，受到相位解包裹算法的限制，條紋投影法和白光相移干涉法對于表面具有復(fù)雜和突變結(jié)構(gòu)的物體都不適用，而類似的復(fù)雜結(jié)構(gòu)又是常見的（例如動物的毛發(fā)、機(jī)械工件的表面毛刺、植物的葉片等）。結(jié)構(gòu)光照明顯微（SIM）是一種特殊照明方式的寬場成像技術(shù)，經(jīng)過特定算法的解算和重構(gòu)可以實現(xiàn)三維光切片成像，并且能夠解析樣品表面的復(fù)雜結(jié)構(gòu)。但目前所有的SIM都是單色的，另外，受顯微物鏡視場大小的限制，SIM技術(shù)目前也僅應(yīng)用于微觀領(lǐng)域。
　　西安光機(jī)所姚保利研究組自2010年開始SIM技術(shù)研究以來，開展了深入細(xì)致的理論和實驗研究工作，提出并實現(xiàn)了基于數(shù)字微鏡器件（DMD）和LED照明的SIM技術(shù)（Scientific Reports 2013，國家發(fā)明ZL201110448980.8）。在本次發(fā)表的研究論文中，通過使用彩色CMOS相機(jī)記錄白光或多色結(jié)構(gòu)光照明獲得的光切片圖像，對傳統(tǒng)光切片SIM技術(shù)采用的均方根層析算法進(jìn)行改進(jìn)，提出了基于HSV彩色空間的彩色解碼算法（已申請國家發(fā)明），獲得了物體高分辨率彩色三維圖像。結(jié)合三維多視場數(shù)據(jù)自適應(yīng)融合技術(shù)，解決了對介觀物體（亞毫米到毫米量級尺寸）顯微成像時，由于顯微物鏡視場有限，無法一次獲得整個物體高分辨三維圖像的問題，視場范圍達(dá)到了2mm2以上。研究組與中科院動物研究所開展了聯(lián)合實驗研究，實現(xiàn)了對螨蟲和昆蟲跳器的彩色三維光切片成像，為該方面的研究提供了有力的。同時對微電子芯片及硬幣表面結(jié)構(gòu)進(jìn)行了大視場彩色三維成像，推動了SIM技術(shù)在三維物體表面形貌測量方面的應(yīng)用。
　　三維成像與測量技術(shù)是目前國內(nèi)外光學(xué)領(lǐng)域一個重要的研究方向，已嵌入到了現(xiàn)代工業(yè)與文化創(chuàng)意產(chǎn)業(yè)的整個流程。該研究取得的成果使西安光機(jī)所在三維顯微成像方面掌握了核心技術(shù)，該技術(shù)通過與生物醫(yī)學(xué)、材料化學(xué)、精密制造等學(xué)科的交叉合作，將大大提高我國在該領(lǐng)域的研究水平，具有廣泛的應(yīng)用前景。

螨蟲（a）和跳甲跳器（b）的彩色三維圖像
數(shù)字微鏡器件芯片的彩色三維圖像
新視窗數(shù)碼升級系統(tǒng)應(yīng)用于傳統(tǒng)顯微鏡無成像系統(tǒng)進(jìn)行無縫改造，使其升級為數(shù)碼顯微鏡，包含顯微鏡成像加裝、新視窗高清顯示屏升級、新視窗高分辨顯示屏成像系統(tǒng)，深度融合數(shù)碼成像高分辨率圖像采集技術(shù)、高清晰圖像顯示技術(shù)、計算機(jī)功能與互聯(lián)網(wǎng)功能，產(chǎn)品跨入了智能化與云端化行列，是一種具備智能化云端終端設(shè)備。適用于學(xué)校顯微鏡數(shù)碼互動教室、研究所等領(lǐng)域。