Streptavidin-SH，鏈霉親和素-巰基的應(yīng)用

鏈霉親和素-巰基（Streptavidin-Thiol）是一種經(jīng)過化學(xué)修飾的鏈霉親和素，通過在其分子結(jié)構(gòu)上引入巰基（-SH）功能團，使其能夠與其他分子或表面進行共價連接，廣泛應(yīng)用于生物研究和診斷領(lǐng)域。

一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)

• 結(jié)構(gòu)：鏈霉親和素是一種高親和力的生物素結(jié)合蛋白，通過在其分子結(jié)構(gòu)上引入巰基（-SH）功能團，形成鏈霉親和素-巰基。

• 性質(zhì)：巰基具有較高的化學(xué)反應(yīng)活性，能夠與多種含有親電基團的分子發(fā)生反應(yīng)，如與馬來酰亞胺基團發(fā)生特異性的邁克爾加成反應(yīng)，還能與金、銀等金屬表面形成穩(wěn)定的化學(xué)鍵。鏈霉親和素-巰基結(jié)合了鏈霉親和素的特異性和巰基的反應(yīng)活性。

二、制備方法

1. 鏈霉親和素純化：通常通過親和層析技術(shù)獲得高純度的鏈霉親和素。

2. 巰基化試劑的選擇：常用的巰基化試劑包括N-(β-巰基乙基)-N’-(3-二甲基氨基丙基)-碳二亞胺（EDC）或NHS-巰基（NHS-thiol）。

3. 化學(xué)反應(yīng)：將鏈霉親和素與巰基化試劑在適宜的溶液體系中反應(yīng)，pH控制在中性或弱堿性，以確保反應(yīng)進行并避免非特異性反應(yīng)。

4. 反應(yīng)條件優(yōu)化：控制反應(yīng)溫度、時間及試劑的濃度，以促進巰基的引入。

5. 純化巰基化鏈霉親和素：反應(yīng)完成后，使用凝膠過濾或親和層析方法純化最終產(chǎn)物，去除未反應(yīng)的試劑和副產(chǎn)物。

三、功能與應(yīng)用

1. 生物偶聯(lián)實驗：利用鏈霉親和素-巰基的巰基與修飾有馬來酰亞胺的生物分子或材料進行偶聯(lián)，然后借助鏈霉親和素與生物素的結(jié)合，實現(xiàn)對目標生物分子的固定、分離或檢測。

2. 表面修飾：可用于修飾金納米顆粒、電極、微孔板等，通過巰基與金等表面形成穩(wěn)定的共價鍵，從而改變這些表面的生物相容性和反應(yīng)性。

3. 免疫檢測與生物傳感：可與生物素標記物形成高親和力結(jié)合，用于ELISA、免疫熒光檢測等。

4. 藥物遞送：通過巰基-馬來酰亞胺偶聯(lián)，可將鏈霉親和素結(jié)合到納米顆粒或抗體上，實現(xiàn)靶向藥物遞送。

5. 納米生物技術(shù)：用于金納米粒子、量子點表面的功能化修飾，廣泛用于生物成像和傳感器開發(fā)。

四、儲存與使用

• 儲存條件：鏈霉親和素-巰基應(yīng)在低溫條件下儲存，如-20°C冷藏保存，以防止巰基氧化和蛋白質(zhì)變性。

• 使用范圍：僅用于科研，不能用于人體實驗。

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